杉木ClHSP 70基因的克隆及表达模式分析.pdfVIP

第４３卷第４期广西师范大学学报(自然科学版)Ｖｏｌ.４３Ｎｏ.４

２０２５年７月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ(ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ)Ｊｕｌ.２０２５

ＤＯＩ:１０.１６０８８/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１￣６６００.２０２４１１０１０４ｈｔｔｐ:ｘｕｅｂａｏ.ｇｘｎｕ.ｅｄｕ.ｃｎ

郭胜周ꎬ许祖元ꎬ刘荣林ꎬ等.杉木ＣｌＨＳＰ７０基因的克隆及表达模式分析[Ｊ].广西师范大学学报(自然科学版)ꎬ２０２５ꎬ４３(４):２１３￣２２３.

ＧＵＯＳＺꎬＸＵＺＹꎬＬＩＵＲＬꎬｅｔａｌ.ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆＣｌＨＳＰ７０ｇｅｎｅｉｎＣｈｉｎｅｓｅｆｉｒ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

(ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ)ꎬ２０２５ꎬ４３(４):２１３￣２２３.

杉木ＣｌＨＳＰ７０基因的克隆及表达模式分析

１ꎬ２ꎬ３１ꎬ２ꎬ３１ꎬ２ꎬ３４１ꎬ２ꎬ３１ꎬ２ꎬ３∗

郭胜周ꎬ许祖元ꎬ刘荣林ꎬ林秦民ꎬ曹光球ꎬ曹世江

(１.福建农林大学林学院ꎬ福建福州３５０００２ꎻ

２.国家林业和草原局杉木工程技术研究中心(福建农林大学)ꎬ福建福州３５０００２ꎻ

３.林木逆境生理生态及分子生物学福建省高校重点实验室(福建农林大学)ꎬ福建福州３５０００２ꎻ

４.福建农林大学生命科学学院ꎬ福建福州３５０００２)

摘要:本研究通过克隆、生物信息学和表达分析方法对杉木热激蛋白７０(ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ７０ꎬＨＳＰ７０)基因进行研究ꎬ

为深入理解杉木ＨＳＰ７０基因的功能和杉木遗传改良以及其可持续栽培提供科学依据ꎮ本研究选用杉木优良无性系“洋

０６１”一年生苗作为试验材料ꎬ利用逆转录聚合酶链式反应(ＲＴ￣ＰＣＲ)克隆得到ＣｌＨＳＰ７０基因ꎮ运用Ｅｘｐａｓｙ软件等在线

软件预测并分析ＣｌＨＳＰ７０蛋白的理化性质、跨膜螺旋域、信号肽、二级结构和三级结构ꎻ运用Ｃｅｌｌ￣ＰＬｏｃ２.０在线软件预

测蛋白的亚细胞定位ꎻ运用Ｍｅｇａ１１软件构建系统发育树ꎻ克隆ＣｌＨＳＰ７０基因并构建到ｐＣＡＭＢＩＡ３５ｓ￣ＥＧＦＰ载体中ꎬ分

析ＣｌＨＳＰ７０蛋白的亚细胞定位ꎻ并利用实时荧光定量ＰＣＲ(ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅａｌ￣ｔｉｍｅＰＣＲ)对其表达水平进行分析ꎮ克隆得到

的ＣｌＨＳＰ７０基因编码６７０个氨基酸ꎬＣｌＨＳＰ７０蛋白的分子式为ＣＨＮＯＳꎬ具有不稳定性ꎬ不含信号肽和跨膜

３２９７５３０６９４０１００８２６

区域ꎬ预测定位于细胞质ꎮ系统进化分析表明ꎬ杉木ＣｌＨＳＰ７０与欧榛Ｃｏｒｙｌｕｓａｖｅｌｌａｎａ亲缘关系更为密切ꎮ亚细胞定位实

验结果显示ꎬＣｌＨＳＰ７０蛋白定位于细胞核ꎻｑＲＴ￣ＰＣＲ表达分析ꎬＣｌＨＳＰ７０基因在叶片中的相对表达量最高ꎮＣｌＨＳＰ７０基

因在高温条件下６ｈ后相对表达量达到峰值ꎬ干旱处理１２ｈ其表达量达到最大值ꎬ即ＣｌＨＳＰ７０基因受高温和干旱胁迫诱

导上调表达ꎮ杉木ＣｌＨＳＰ７０基因的成功克隆与序列分析ꎬ揭示了其在杉木不同组织中的表达及对高温与干旱胁迫的响

应ꎬ并为杉木抗逆性育种提供重要的理论基础ꎮ

关键词:杉木ꎻＣｌＨＳＰ７０基因ꎻ基因克隆ꎻ亚细胞定位ꎻ高温与干旱胁迫

中图分类号:Ｓ７２