T_HBZMXH 00001-2025 白桦组织培养育苗技术规程.docxVIP

ICS65.020.20

CCSB61

团体标准

T/HBZMXH00001—2025

白桦组织培养育苗技术规程

Technicalproceduresandregulationsfortissuecultureandseedling

cultivationofBetulaplatyphylla

2025-06-11发布2025-06-11实施

河北省林木种苗协会发布

I

T/HBZMXH00001—2025

目次

前言 Ⅱ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4培养基制备 1

5组培苗生产 2

附录A（规范性）MS基本培养基配方 5

附录B（规范性）WPM基本培养基配方 6

II

T/HBZMXH00001—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由河北省林木种苗协会提出并归口。

本文件起草单位：河北农业大学、河北省林业和草原科学研究院。

本文件主要起草人：樊彦聪、冯树香、陈丽英、刘易超、李泳潭、闫淑芳、李平、刘煜光、代嵩华、冯君明、周杨、张梦涵、宋佳璇、杜睿哲、齐梓伊、杜豫怡。

1

T/HBZMXH00001—2025

白桦组织培养育苗技术规程

1范围

本文件规定了白桦（Betulaplatyphylla）组培育苗过程中培养基制备、组培苗生产等环节的技术要求。

本文件适用于白桦组培育苗。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1882—2010林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

LY/T1882—2010界定的植物组织培、外植体、培养基、培养基母液、接种、继代培养的术语和定义适用于本文件。

4培养基制备

4.1基本培养基

基本培养基采用WPM和MS培养基。

4.2初代培养基

以白桦叶片为外植体，初代培养选用WPM培养基（木本植物组织培养基）作为基本培养基。具体配方为：WPM+6-苄氨基嘌呤（6-BA）0.5mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5～6.5g/L。

以白桦茎段为外植体，初代培养选用MS培养基作为基本培养基。具体配方为：MS+6-苄氨基嘌呤（6-BA）1mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5～6.5g/L。

4.3继代培养基

WPM+6-苄氨基嘌呤（6-BA）1.0mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.0～6.5g/L。

4.4生根培养基

1/2MS+吲哚丁酸（IBA）0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5～6.5g/L。

4.5母液配制与保存

4.5.1培养基母液配制浓度

见附录A、B。

2

T/HBZMXH00001—2025

4.5.2激素配制浓度

激素浓度为0.5～1.0mg/mL。

4.5.3保存

将培养基母液试剂瓶分别贴上标签，标注母液名称、配制倍数和日期，置于冰箱冷藏4℃保存。

4.6培养基配制

4.6.1母液用量计算

根据培养基配方与培养基配制数量，计算各种母液的用量及配方中其他成分的用量，并记录在册。

4.6.2煮制培养基

按照计算结果称量琼脂与蔗糖，加入馏水中，蒸馏水的量以培养基配制体积的1/2～2/3为宜，加热溶解，不断搅拌，熬至琼脂充分溶解。

4.6.3定容

在容器内加入煮制好的培养基，后加入大量元素母液、钙元素母液、铁元素母液、有机物母液、微量元素母液。各母液取用量按照本文件附录A、B的规定执行。搅拌均匀。根据初代培养、继代培养、生根培养的要求加入相应种类和用量的生长调节剂。搅拌后加蒸馏水定容。

4.6.4pH值调节

用0.1mol/L盐酸或0.1mol/L氢氧化钠调节pH值为5.8～6.0。

4.6.5分装封口

将培养基分装到培养容器中，用封口膜、封口盖封口。

4.6.6灭菌

将培养基放入高压蒸汽灭菌器内灭菌。灭菌温度121℃,灭菌时间20min。

4.6.7保存

灭菌后的培养基贴上标签，注明名称、配制人、灭菌时间等。放置于干净、阴凉的室内常温平放保存，保存时间不宜超过1周。

5