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pcr考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术的发明人是（）

A.穆利斯B.桑格C.沃森D.克里克

2.PCR反应体系中不包括以下哪种成分（）

A.引物B.dNTPC.Taq酶D.限制性内切酶

3.引物设计时，其长度一般为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

4.PCR反应的变性温度一般为（）

A.55℃左右B.72℃左右C.94-95℃D.100℃

5.以下哪种不是PCR常见的应用领域（）

A.基因克隆B.疾病诊断C.蛋白质结构分析D.法医鉴定

6.Taq酶具有以下哪种特性（）

A.耐高温B.耐低温C.耐强酸D.耐强碱

7.PCR反应中，延伸时间主要取决于（）

A.引物长度B.模板长度C.dNTP浓度D.Taq酶活性

8.引物的退火温度与以下哪个因素无关（）

A.引物长度B.引物GC含量C.模板浓度D.碱基组成

9.进行PCR反应时，模板DNA的量一般为（）

A.越多越好B.越少越好C.适量D.无所谓

10.巢式PCR的特点是（）

A.提高特异性B.降低特异性C.减少引物用量D.缩短反应时间

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR反应体系包含（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶E.缓冲液

2.引物设计的基本原则包括（）

A.长度合适B.避免形成引物二聚体C.具有合适的GC含量D.3’端避免错配E.5’端可修饰

3.PCR常见的影响因素有（）

A.模板质量B.引物浓度C.Taq酶活性D.反应温度E.循环次数

4.下列哪些属于PCR的应用（）

A.基因分型B.病毒检测C.肿瘤诊断D.物种鉴定E.基因表达分析

5.提高PCR特异性的方法有（）

A.优化引物设计B.调整反应条件C.使用热启动Taq酶D.增加模板量E.降低dNTP浓度

6.PCR反应的循环过程包括（）

A.变性B.退火C.延伸D.复性E.终止

7.以下关于Taq酶的说法正确的是（）

A.具有5’→3’聚合酶活性B.具有3’→5’外切酶活性C.扩增片段长度有限D.耐高温E.对Mg2?浓度敏感

8.引物的作用是（）

A.引导DNA合成B.决定扩增片段的长度C.提供3’-OH末端D.与模板特异性结合E.提高反应效率

9.在PCR实验中，可能出现的问题有（）

A.扩增产物条带模糊B.非特异性扩增C.无扩增产物D.引物二聚体形成E.扩增片段大小异常

10.实时荧光定量PCR的应用有（）

A.基因表达定量分析B.病原体核酸定量检测C.单核苷酸多态性分析D.甲基化分析E.肿瘤标志物检测

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR技术可以扩增任何DNA片段。（）

2.引物的GC含量越高，退火温度越低。（）

3.Taq酶没有3’→5’外切酶活性，所以保真性较差。（）

4.PCR反应中，循环次数越多，扩增效果越好。（）

5.模板DNA可以是基因组DNA、线粒体DNA等。（）

6.引物二聚体的出现不会影响PCR结果。（）

7.实时荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（）

8.进行PCR实验时，实验环境不需要特别注意。（）

9.只要引物设计正确，PCR反应就能成功。（）

10.降落PCR可以提高扩增的特异性。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR的基本原理。

答案：PCR基于DNA半保留复制原理，通过高温变性使双链DNA解链，低温退火让引物与模板结合，适温延伸由Taq酶催化dNTP合成新的DNA链，经多轮循环实现特定DNA片段的大量扩增。

2.引物设计的注意事项有哪些？