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低氧环境下HIF1NI调控线粒体自噬抑制软骨细胞的机理研究
目录
低氧环境下HIF1NI调控线粒体自噬抑制软骨细胞的机理研究（1）．．4
一、研究背景及目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
相关领域研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
二、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
（1）软骨细胞来源及培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
（2）主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
（1）低氧环境模拟．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
（2）HIF1α基因表达调控研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
（3）线粒体自噬的检测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
（4）软骨细胞功能及形态学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
（5）数据处理与统计分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
三、低氧环境下软骨细胞生物学特性变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
软骨细胞在低氧环境下的生存状态．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
低氧对软骨细胞功能的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
低氧环境下软骨细胞代谢途径的变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
四、HIF1α在低氧环境下的表达及其调控作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
HIF1α在低氧环境下的表达特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
HIF1α对软骨细胞代谢的调控作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
HIF1α对线粒体自噬的影响及其机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
（1）HIF1α对线粒体自噬相关基因的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
（2）HIF1α通过何种信号通路影响线粒体自噬的研究分析．．．．．．．．59
（3）HIF1α调控线粒体自噬的具体分子机制探讨．．．．．．．．．．．．．．．．61
五、线粒体自噬在低氧环境下软骨细胞中的作用研究．．．．．．．．．．．．64
线粒体自噬在低氧环境下软骨细胞中的表现及特点分析．．．．．．．65
线粒体自噬对软骨细胞功能的影响研究分析．．．．．．．．．．．．．．．．．69
线粒体自噬在软骨细胞中的信号通路及其分子机制探讨．．．．．．．75
（1）线粒体自噬相关信号通路的鉴定与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79
（2）关键分子的功能及其调控机制分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80
（3）线粒体自噬与软骨细胞代谢途径的关系研究分析．．．．．．．．．．．84
（4）线粒体自噬对软骨细胞抗凋亡和抗炎等作用研究分析．．．．．．．88
低氧环境下HIF1NI调控线粒体自噬抑制软骨细胞的机理研究（2）．90
研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．90
1.1低氧工况对软骨细胞的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．91
1.2HIF1NI蛋白的生物学特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．92
1.3线粒体自噬在软骨细胞稳态中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．94
1.4研究的临床与理论价值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．97
实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．97
2.1实验材料与设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．102
2.2软骨细胞分离与培养方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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