紫外分光光度计结构与实验技术.pptVIP

紫外分光光度计结构与实验技术第1页，共12页，星期日，2025年，2月5日紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品池（吸收池）、检测器及放大器和记录显示系统所组成。一、紫外分光光度计结构第2页，共12页，星期日，2025年，2月5日1、光源钨灯丝和氢灯两种钨灯丝适宜使用的范围是360nm~1000nm；氢灯或氘灯适宜使用的范围是150nm~360nm。因为玻璃会吸收紫光，灯泡必须用石英材料第3页，共12页，星期日，2025年，2月5日2、单色器（分光系统）单色器是指能将来自光源的复色光按波长长短顺序色散为单色光，并能任意调节波长的装置。常由棱镜和光栅组成。经棱镜或光栅色散成一系列由单色光带组成的光谱，逐个从单色器的出口狭缝射出。第4页，共12页，星期日，2025年，2月5日3、样品池（参比池）可见光区可使用玻璃制的样品池（玻璃在波长＜200nm有吸收），紫外区可使用石英样品池（石英在波长＜200nm无吸收）。样品池和参比池需要配对（即完全相同的两个），其厚度（光束通过溶液的路径长度）一般为1mm、2mm、5mm、1cm、2cm、4cm。如在定量测定时，所使用的一组样品池要完全一致。第5页，共12页，星期日，2025年，2月5日检测器又称接受器，透过试液的光用光电管来接受。由单色器的出口狭缝射出的单色光束被旋转折光器分成两束按一定频率交替投射到样品池和参比池上，如果样品池中样品吸收了部分光辐射能，则透过样品池和参比池的两光束不再平衡。光信号经光电倍增管及电子元件组成的检验器、放大器进行检验、比较和放大。放大后的电信号由显示记录系统输出吸光度、波长等数据或给出吸收曲线。4、检测器第6页，共12页，星期日，2025年，2月5日通常在紫外分光光度计中，装置有紫外光源-氘灯及可见光源-卤钨灯，只需切换光源，就可以用来用来测定可见吸收光谱。因此也称为紫外-可见分光光度计。一般紫外分光光度计光学系统的结构有两类：

一类是单波长分光光度计；

一类是双波长分光光度计。第7页，共12页，星期日，2025年，2月5日二、紫外分光光度计的校正

1、波长校正

2、吸光度校正

3、吸收池校正第8页，共12页，星期日，2025年，2月5日第9页，共12页，星期日，2025年，2月5日**由于制造吸收池材料的不均匀性和制造上的差异，可能会使吸收池的透光性产生某些变化，有时需检查（检查的方法为：设A吸收池装试样溶液，B吸收池装参比溶液，测定试样吸光度，然后互相交换，用B吸收池装试样溶液测定其吸光度，两次测得的吸光度之差应小于1%，如果超过1%，说明两个吸收池差异太大，需要另选一对差异较小的吸收池，这样的检查应该选几个波长逐点进行校正）。