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第1页,共19页,星期日,2025年,2月5日实验目的1.掌握植物化感基本理论;2.了解入侵植物的化感作用,深刻理解生态入侵概念及其入侵机制;3.掌握植物浸提液的提取、制备方法;4.掌握基本植物化感作用的实验方法。第2页,共19页,星期日,2025年,2月5日实验原理植物化感作用是指:植物(含微生物)通过释放化学物质到环境中而产生对其它植物直接或间接的有害作用。植物化感作用可在种间进行,也可以在种内进行。第3页,共19页,星期日,2025年,2月5日植物化感作用具有3个基本特征:1)相互作用的主客体均是植物,不包括植物和动物及其它有机体的相互作用。2)相互作用的化学物质是植物的次生代谢物质,而且必须有适合的途径进入环境中,不包含在植物体内变化的次生代谢物质。3)化感物质主要用于影响自身或邻近植物的生长发育,若用于植物间的化学通讯(如报警)或污染环境(如一些树木挥发物和氧化氮形成烟雾)也不属于化感作用研究范畴。第4页,共19页,星期日,2025年,2月5日植物化感作用的媒体是化学物质,被称为“化感物质”(Allelochemical)。第5页,共19页,星期日,2025年,2月5日在自然状态下,除了水以外,不可能有其它溶剂将植物中的化学物质淋溶出来,而且植物的次生代谢物质目前已超过3.0×104种,如果用有机溶剂淋溶(或浸提),任何一种植物都可能会有几个影响其它植物生长的次生代谢物质。植物化感物质的研究和从植物中提取天然产物或确定植物的化学成分研究有着本质的不同。第6页,共19页,星期日,2025年,2月5日在生态入侵过程中,外来入侵物种长通过淋溶、挥发、残体分解和根系分泌向环境释放化学物质,对周围植物(包括微生物)产生间接或直接有害或有利的作用,即化感作用(是其入侵方式之一)。第7页,共19页,星期日,2025年,2月5日实验器材与材料植剪、培养皿、小铲、蒸馏水、烧杯、电子分析天平、离心管、离心机、三角烧瓶(50ml、500ml)、定性滤纸、记录本、烘箱、光照培养箱等。校园内踏查,选取加拿大一枝黄花(也可选取其它入侵植物)。受试植物种子:农作物种子:玉米、黄瓜、莫斯科甜玉米、小麦、黄瓜、黑糯玉米;杂草种子:狗牙根、狼尾草、黑麦草、高羊茅草、苏丹草。第8页,共19页,星期日,2025年,2月5日实验步骤1.植物浸提液的提取、制备方法:野外采集植物(全株)(取叶和根)洗净、自然风干(取叶和根)洗净、烘干(105℃杀青、65℃烘12h)或者磨碎过筛(40目或60目)精确称取1g干重加50ml蒸馏水超声30min浸提24h或48h离心(4000转10min)或过滤取上清液得浸提液的原液(浓度相当于20mg/ml干物质)(冷藏保存)第9页,共19页,星期日,2025年,2月5日2.浸种:3人一小组,选择受试作物种子1~2种、杂草种子2种,将受试的作物和杂草种子用0.5%的硫酸铜溶液浸泡1~2h,蒸馏水冲洗干净。第10页,共19页,星期日,2025年,2月5日培养皿在160~180℃下干热灭菌2h,冷却至室温,放入2层滤纸,备用。第11页,共19页,星期日,2025年,2月5日实验处理:每组自行合理设置3个入侵植物的叶(地上部分)和根(地下部分)的浸提液的浓度梯度(本实验不规定浓度梯度,以免各组数据千篇一律),以蒸馏水作为对照组(CK组),每个处理组设3个平行。第12页,共19页,星期日,2025年,2月5日种子培养:挑选籽粒大小相当的种子播于铺有滤纸的培养皿内,每个培养皿播30粒种子(玉米20粒)。分别加入不同浓度的培养液5~10ml左右,置于22~25℃条件下培养。培养期间,每天须在一固定时间,添加不同浓度的培养液以保持一定湿度(用滴管轻轻加入,以免冲乱种子)。第13页,共19页,星期日,2025年,2月5日实验记录:实验开始后,逐日记录萌发的种子数,记入下表中:提取液浓度平行组培养时间/d1234567…….浓度1ABC浓度2ABC浓度3ABCCKABC第14页,共19页,星期日,2025年,2月5日
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