实验一 光学显微镜的结构及使用方法.pptVIP

第1页，共24页，星期日，2025年，2月5日一、目的要求熟悉普通光学显微镜的构造和性能掌握显微镜的使用方法了解光学显微镜的维护方法第2页，共24页，星期日，2025年，2月5日二、实验原理显微镜可将微小物体放大物镜和目镜的作用相当于一个凸透镜标本放在物镜下方1～2倍焦距之间，在明视距离为25cm，见到放大的清晰物象第3页，共24页，星期日，2025年，2月5日光学显微镜的成像原理第4页，共24页，星期日，2025年，2月5日显微镜的重要光学技术参数分辨率、放大率、镜口率、焦点深度和视场宽度等反映了显微镜的性能和质量第5页，共24页，星期日，2025年，2月5日数值孔径（镜口率）

numericalaperture,N.AN.A是物镜前透镜与被检物体之间介质的折射率（n）和镜口角（α）半数的正玄之乘积，即N.A＝n·sinα/2镜口角α是物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度。镜口角越大，进入物镜的光通亮就越大，它与物镜的有效直径成正比，与焦点的距离成反比第6页，共24页，星期日，2025年，2月5日－－－－－1/2αobjectivesample第7页，共24页，星期日，2025年，2月5日间质折射率（n）空气为1水为1.33油为1.5物镜N.A值·空气为0.05~0.95·水为0.1~1.20·油为0.83~1.40第8页，共24页，星期日，2025年，2月5日分辨率（R）显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力人眼分辨率约为100um，光镜为0.2um计算公式0.61λN.AR==0.61λN·sinα/2=0.61×0.51.50×1.0=0.2um（光镜最大分辨率）注：λ——光波波长（白光为0.5）N——介质折射率α——镜口角第9页，共24页，星期日，2025年，2月5日放大率（放大倍数）放大倍数＝目镜放大倍数×物镜放大倍数最小倍数＝5×4＝20最大倍数15×100＝1500放大倍数的表示用×，如10×,100×，…第10页，共24页，星期日，2025年，2月5日焦点深度（焦深）在使用显微镜时，当焦点对准某一物体时，不仅位于该点平面上的各点都可以看清楚，而且在此平面的上下一定厚度内，也能看得清楚，这个清楚部分的厚度就是焦深。焦深大,可以看到被检物体的全层，而焦深小，则只能看到被检物体的一薄层在数值孔径0.95时约为非常浅的0.2μ第11页，共24页，星期日，2025年，2月5日视场宽度在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围。视场宽度愈大，愈便于观察。视场的大小，是由目镜里的视场光阑决定的。视场宽度与物镜的放大倍数成反比因此，低倍镜看整体，高倍镜看局部第12页，共24页，星期日，2025年，2月5日三、内容与方法（一）显微镜的构造及功能1.机械部分镜筒（tube）物镜转换器（revolvingnose-piece）镜臂（arm）调焦器（focusingadjustment）coarsefocusandfinefocus载物台（stage）镜柱（post）镜座（base）第13页，共24页，星期日，2025年，2月5日第14页，共24页，星期日，2025年，2月5日第15页，共24页，星期日，2025年，2月5日倒置显微镜第16页，共24页，星期日，2025年，2月5日2.光学系统部分目镜（ocular）5×，10×，15×物镜（objective）4×,10×,40×,100×聚光器（condenser）光源及光阑第17页，共24页，星期日，2025年，2月5日