文心兰软腐病菌Dickeya fangzhongdai Onc5 vfmE基因的克隆及表达分析.pdfVIP

热带作物学报2025,46(3):544552

ChineseJournalofTropicalCrops

文心兰软腐病菌DickeyafangzhongdaiOnc5vfmE基因的克

隆及表达分析

王文婷，任驰，丁建华，荆恩荣，卢秋巍*

忻州师范学院生物系，山西忻州034000

摘要：狄克氏菌（Dickeyafangzhongdai）是引起兰科植物毁灭性病害软腐病（softrotdisease）的主要病原菌之一。

病原菌致病基因在病原菌与植物互作中发挥至关重要的作用。软腐病菌D.fangzhongdaiOnc5从福建南茜文心兰

（Oncidium，GowerRamsey）软腐病患病植株中分离而来。本研究旨在明确D.fangzhongdaiOnc5vfmE基因的分子生

物学特征，并分析其在侵染寄主过程中的作用，为揭示vfmE基因在D.fangzhongdaiOnc5侵染寄主过程中的致病机制

提供理论依据。本研究以D．fangzhongdaiOnc5基因组DNA为模版，通过RT-PCR扩增，成功获得vfmE基因，并进

行生物信息学分析；利用RT-qPCR分析vfmE基因在D.fangzhongdaiOnc5侵染文心兰过程中的表达情况。结果表明：

D.fangzhongdaiOnc5vfmE基因的ORF为564bp，编码187个氨基酸；vfmE蛋白质的分子质量为21.93kDa，理论等

电点（pI）为9.01，含1个AraC超家族结构域；vfmE蛋白质为结构不稳定的亲水性蛋白，无信号肽，不存在跨膜结

构域；其蛋白质二级结构主要为α-螺旋（58.29%）和无规则卷曲（40.64%）；同源性分析表明，其氨基酸序列与Dickeya

属其他菌种的vfmE序列具有很高的相似性（86%）；RT-qPCR分析表明：vfmE基因在D．fangzhongdaiOnc5侵染文

心兰叶片和假鳞茎后均持续高表达，在12h的表达量最高（P0.01），表明vfmE蛋白在D.fangzhongdaiOnc5侵染文

心兰的过程中发挥着重要的作用。本研究结果为进一步研究vfmE基因功能和Dickeya属病原菌致病机制提供提论基础，

同时也有利于发展植物软腐病新的防治靶标。

关键词：狄克氏菌；vfmE基因；克隆；生物信息学分析；表达分析

中图分类号：S432.1文献标志码：A

CloningandExpressionAnalysisofvfmEgenefromSoftRotPatho-

genDickeyafangzhongdaiOnc5ofOncidium

*

WANGWenting,RENChi,DINGJianhua,JINGEnrong,LUQiuwei

DepartmentofBiology,XinzhouNormalUniversity,Xinzhou,Shanxi034000,China

Abstract:Dickeyafangzhongdaiisoneofthemainpathogenscausingthedevastatingdisease(softrotdisease)ofOr-

chidaceae.Pathogenicgenesplayacrucialroleintheinfectionprocess.DickeyafangzhongdaiOnc5wasisolatedfrom

thediseasedplant(Oncidium,GowerRamsey)inFujianprovince.Pathogenicgeneplayanimportantroleintheinter-

actionbetweenpathogensandplants.Thepurposeofthisstudywastolarifythemolecularbiologicalcharacteristicsof

D.fangzhongdaiOnc5vfmEgeneandanalysisitsrole