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紫薇花类黄酮合成基因克隆及功能探究

目录

紫薇花类黄酮合成基因克隆及功能探究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2类黄酮化合物概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.3紫薇属植物资源及研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.4本研究的切入点与目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

研究方法与材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.1实验材料与来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.2实验设备与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.3基因克隆方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.3.1总DNA提取与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.3.2目标基因的PCR扩增．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.3.3基因片段的回收与克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.3.4质粒构建与转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.3.5基因序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

2.4基因功能分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.4.1表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.4.2筛选体系的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.4.3转基因体鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.4.4转基因体表型分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

2.5数据统计分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.1紫薇基因组DNA的提取与检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

3.2目标基因的获得与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

3.3基因克隆载体的构建与验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.4转基因紫薇的获得与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

3.5转基因紫薇的表型观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

3.6转基因影响紫薇花青素积累的分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

3.7转基因对紫薇抗氧化能力的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

3.8转基因影响紫薇中类黄酮合成相关基因表达的模式．．．．．．．．．．62

紫薇花类黄酮合成基因克隆及功能探究（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

一、文档概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

（一）研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

（二）研究内容与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

二、紫薇花类黄酮合成基因的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．72

（一）紫薇花概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76

（二）类黄酮简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．77

（三）紫薇花类黄酮的研究历史与现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79

（四）紫薇花类黄酮合成基因的研究趋势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8