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核酸pcr实验室考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR反应中，延伸温度一般为（）

A.55℃B.72℃C.94℃D.4℃

2.核酸提取过程中，常用的裂解液成分不包括（）

A.Tris-HClB.EDTAC.SDSD.NaCl

3.PCR反应体系中，Taq酶的作用是（）

A.解链DNAB.连接DNA片段C.催化DNA合成D.修饰DNA

4.核酸检测样本采集后，暂时保存的温度一般是（）

A.37℃B.25℃C.4℃D.-20℃

5.下列哪种物质不是PCR反应的原料（）

A.dATPB.dUTPC.dCTPD.dGTP

6.实验室进行核酸检测时，常使用的阳性对照是（）

A.水B.已知核酸样本C.空气D.试剂空白

7.核酸提取时，离心的主要目的是（）

A.混合均匀B.使核酸变性C.分离不同成分D.加热样本

8.荧光定量PCR技术的英文缩写是（）

A.RT-PCRB.qPCRC.ddPCRD.LAMP

9.进行PCR实验时，防止交叉污染的措施不包括（）

A.分区操作B.戴手套C.实验后不消毒D.使用一次性耗材

10.核酸的基本组成单位是（）

A.氨基酸B.脂肪酸C.核苷酸D.单糖

答案：1.B2.D3.C4.C5.B6.B7.C8.B9.C10.C

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR反应的基本步骤包括（）

A.变性B.退火C.延伸D.复性

2.核酸提取方法有（）

A.酚氯仿抽提法B.磁珠法C.硅胶膜吸附法D.离心法

3.实验室常用的核酸检测仪器有（）

A.离心机B.荧光定量PCR仪C.生物安全柜D.核酸蛋白分析仪

4.核酸样本采集部位可能包括（）

A.鼻咽拭子B.口咽拭子C.血液D.粪便

5.影响PCR反应结果的因素有（）

A.引物设计B.模板质量C.反应体系成分D.反应温度和时间

6.核酸检测质量控制包括（）

A.室内质控B.室间质评C.人员培训D.仪器校准

7.防止核酸污染的措施有（）

A.严格分区B.定期清洁消毒C.正确处理废弃物D.通风良好

8.PCR引物设计的原则包括（）

A.长度合适B.避免形成二聚体C.特异性强D.GC含量适中

9.核酸检测相关的防护用品有（）

A.防护服B.口罩C.护目镜D.手套

10.核酸检测的应用领域包括（）

A.疾病诊断B.基因分型C.法医鉴定D.动植物检疫

答案：1.ABC2.ABC3.ABD4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR反应中，引物浓度越高越好。（）

2.核酸提取后可以直接进行PCR反应，无需检测浓度。（）

3.生物安全柜可以完全防止核酸污染。（）

4.荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（）

5.核酸样本采集后可以长时间室温放置。（）

6.不同的核酸提取方法可能得到不同质量的核酸。（）

7.PCR实验中，阴性对照出现扩增曲线说明实验无污染。（）

8.核酸检测操作人员不需要进行专门培训。（）

9.引物的特异性决定了PCR反应的特异性。（）

10.核酸在酸性环境中更稳定。（）

答案：1.×2.×3.×4.√5.×6.√7.×8.×9.√10.×

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR反应原理。

答案：PCR即聚合酶链式反应，以目的DNA为模板，在引物、dNTP、Taq酶等作用下，经过高温变性使双链DNA解开，低温退火让引物与模板结合，适温延伸由Taq酶催化合成新的DNA链，如此循环扩增目的DNA片段。

2.核酸提取过程中需要注意哪些问题？

答案：要注意防止核酸降解，控制好温度、时间；避免核酸污染，实验环境和器材要清洁消毒；确保提取效率，选择合适方法和试剂；提取后及时检测核酸浓