高考生物一轮复习讲义：基因工程的基本工具与操作程序.pdfVIP

第57讲基因工程的基本工具与操作程序

【课标要求】1.概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而

的；2.阐明重组DNA技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具；3.阐

明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目

的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤。

考点1基因工程的基本工具

考点透析

知识1基因工程概述

基因工程又叫作重组DNA技术。

项目内容

主要技术转基因技术

操作环境—

操作水平—

理论依据基因重组

供体提供_________

受体复制或表达目的基因

基本过程切割f改造和拼接一导入f表达

克服______________的障碍，

优点

定向改造生物的________________

知识2基因工程的基本工具

1.限制性内切核酸酶(限制酶)

图中可见，限制酶在识别序列中心轴线两侧切开产生的是,在识别序列中心轴线处切开产

生的是o

2.DNA连接酶

(1)作用：在两个核甘酸之间形成以连接两个DNA片段。

(2)主要类型：①E.co〃DNA连接酶：从中分离；②____________：从T4噬菌体中分离。两

者都能连接和平末端，但前者连接具有平末端的DNA片段的效率远远低于后者。

归纳总结

与DNA有关的酹

酶作用作用相关“键”

切割DNA片段，产生两个具（有相同熟

限制酶破坏磷酸二酯键

性末端或平末端）DNA片段

DNA催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯

形成磷酸二酯键

连接酶键，从而连接起

将双桂DNA分子局部解旋为单链A（TP

解旋酶破坏氢键氢（键非化学键）

水解供能）

DNA把游离的脱氧核甘酸连接到引物或者已

形成磷酸二酯键

聚合胸有的DNA单链的3端上

DNA

将DNA水解为脱氧核甘酸破坏磷酸二酯键

水（解）酶

逆转录酶以RNA为模板合成cDNA形成磷酸二酯键

3.载体

1（）作用：将基因送入细胞。

2（）种类：质粒、、匆植物病毒等。

3（）重要的载体之一——质粒

①质粒的本质：是一种裸露的