酶动力学和酶反应器.pptxVIP

第五章酶反应工程

5.1酶反应动力学讨论酶催化反应速度问题，研究各种因素对反应速度的影响，提出从反应物到产物之间可能进行为历程。01它遵守化学反应动力学的一般规律，但又有其自身特点.02酶催化反应体系很复杂，且影响酶反应的因素很多，包括底物浓度、酶浓度、产物、pH、温度、抑制剂和激活剂等。03

1925年Briggs和Haldane引入恒态概念，解释动力学性质。1902年Henri和Brown分别提出了酶促反应中酶-底物络合物生成，并推出数学公式。1913Michaelis和Menten推导出单底物动力学模型。1965年Monod,Wyman和changeus建立了变构酶动力学模型。

Michaelis-Menten快速平衡学说

E+P?EP(ES)这一逆反应忽略不计。当测量初速度时，底物S消耗很少，此时P?0，所以可忽略k-2(通常认为底物浓度消耗5％之内的速度为初速度)。01当[S]》[E]，即底物浓度[S]显著超过酶浓度[E]时，则ES形成不会明显降低底物浓度[S],底物浓度[S]以起始浓度计.02酶E和底物S结合成ES的速度显著快于ES形成P+E的速度，也就是说在可逆反应初速度测定时间内，03E+SES已达到平衡。04

Ks=k-1/k1为ES的解离常数，Vm为最大速度

Briggs-Haldane稳态学说当k2k-1时快速平衡不一定能成立。在反应进行一段时间后，在一定时间内尽管[E]、[P]不断交化，中间物也在不断生成与分解，但当中间物的生成、分解速度接近相等，它的浓度变化很小时，这种状态叫做稳态。

当v=1/2Vm时,1/2Vm=Vm[S]/(Km+[S])

Km=[S]

Km为反应速度为最大反应速度一半时的的底物浓度.单位为摩尔/升。Km值是酶的特征常数之一，在特定条件下只与酶的性质有关与酶的浓度无关。同一种酶底物不同Km也不同。Km最小的底物为最适底物或天然底物。Km值受pH,温度等条件影响。因此测定Km值时需指明测定的条件。Ks是ES的解离常数，用于表示酶与底物的亲和力，Ks越小与底物亲和力越大。Km通常也可表示与底物的亲和力1)Km的意义

酶底物Km蔗糖酶糖蔗2.8X10-2蔗糖酶棉子糖35X10-2麦芽糖酶麦芽糖2.1X10-1

v=k2[ES],当[S][E]时底物与酶完全结合,[ES]=[E0],反应速度达到最大，v=Vm，所以Vm=k2[E0],k2=Vm/[E0],单位1/s反映了酶催化中间复合物转变为产物的能力。其值越大表示酶的催化效率越高。

3）反映了反应速度与底物浓度的关系。V=Vm[S]/(Km+[S])当SKm时，V=Vm，达到最大反应速度。并与底物浓度无关。当SKm时，v=Vm[S]/Km，v正比于[S]，可用于酶法分析测定底物含量。通常使酶过量反应在短时间内完成。

4）反应了酶反应速度与酶浓度的关系v=Vm[S]/(Km+[S]),Vm=k2[E0]01v=k2[E0][S]/(Km+[S])02当SKm时v=Vm=k2[E0],即v正比于酶的初始浓度。这可用于酶活测定。因此测定酶活时底物浓度应过量。03

11Lineweaver-Burk作图法（双倒数作图法）2即：31/v=(Km/Vm)(1/[S])+1/Vm4用1/v对1/[S]作图可得一条直线，截距为1/Vm，斜率为Km/Vm,即可求得Vm及Km.5缺点是误差较大，主要是因为在低底物浓度时取倒数误差较大。

优点数据分布均匀。以[S]/v对[S]作图得一直线，截距为Km/Vm,斜率为1/Vm/v=Km/Vm+[S]/Vm

降低的原因是酶蛋白的变性。温度升高反应速度通常开始增加，到一最大值后开始快速下降。有一最适温度。反应速度升高的原因是反应物能量增加，单位时间内有效碰撞次数增加。

pH的改变影响分子中另一些基团的解离，这些基团的离子化状态与酶的专一性及酶分子中活性中心构象有关；pH改变会影响底物分子,酶分子活性部位,中间产物ES的解离状态,总之都会影响ES的形成，从而降低酶活性；pH可以改变酶的酶蛋白的空间构象，引起酶发生可逆或不可逆的变性而失活；

凡能降低酶催化反应速度的物质都称为抑制剂。抑制剂与酶的活性中心或辅基结合，影响其结构与性质从而影响酶反应速度。对酶有一定的选择性，只能引起一类或几类酶的抑制，不包括使酶水解及变性的物质。

分类01可