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鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留检测方法的构建与优化

一、引言

1.1研究背景

鸡球虫病是一种由艾美耳球虫寄生于鸡肠道上皮细胞引起的寄生虫病，对养鸡业危害巨大。在集约化养殖模式下，鸡群饲养密度高，球虫病传播迅速，一旦爆发，雏鸡发病率可达50%-70%，死亡率在20%-30%。病愈雏鸡生长受阻，成年鸡产蛋和增重能力下降，还会成为传播病源。此外，球虫病会导致鸡消化机能障碍，肠道黏膜受损，引发肠毒综合征，还会影响肠道黏膜屏障机能，导致免疫抑制，增加其他疾病感染几率，给养鸡业带来巨大的经济损失，全球家禽业每年因球虫病损失约20亿英镑。

为预防和治疗鸡球虫病，地克珠利和妥曲珠利作为高效的三嗪类抗球虫药被广泛应用。地克珠利作用于球虫的不同发育阶段，对鸡柔嫩、堆型、毒害等多种艾美耳球虫效果极佳，能有效控制盲肠球虫的发生和死亡，甚至使病鸡球虫卵囊全部消失。妥曲珠利则对球虫的裂殖体和小配子体的核分裂以及小配子体的壁形成体有抑制作用，干扰球虫细胞核分裂和线粒体，影响虫体呼吸和代谢功能，对鸡堆型、布氏、巨型等多种艾美耳球虫以及羊、兔的球虫病都有良好防治效果。

然而，这些药物在鸡组织中的残留问题不容忽视。若人类食用了含有超量地克珠利和妥曲珠利残留的鸡肉及其制品，药物残留可能在人体内蓄积，对人体健康产生潜在威胁，如影响人体的免疫系统、神经系统等。为保障消费者的食品安全，许多国家和地区都制定了严格的地克珠利和妥曲珠利在动物源食品中的最大残留限量标准。因此，建立灵敏、准确、高效的鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留检测方法至关重要，对于监控药物残留、保障食品安全具有重要意义。

1.2研究目的与意义

本研究旨在建立一套快速、灵敏、准确且高效的鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留检测方法，通过对样品前处理方法的优化以及仪器分析条件的摸索，实现对鸡组织中这两种抗球虫药残留的精确测定。

从保障食品安全角度来看，随着人们生活水平的提高，对食品安全的关注度日益增加。地克珠利和妥曲珠利作为常用抗球虫药，其在鸡组织中的残留情况直接关系到消费者的健康。若鸡肉及其制品中药物残留超标，长期食用可能会对人体免疫系统、神经系统等产生潜在危害，如导致免疫功能下降、神经功能紊乱等。建立有效的检测方法能够及时监控鸡组织中药物残留量，确保上市的鸡肉产品符合食品安全标准，保障消费者的饮食安全。

在规范兽药使用方面，目前部分养殖户为追求经济效益，存在不合理使用地克珠利和妥曲珠利的现象，如超剂量使用、不遵守休药期等。通过建立准确的残留检测方法，可以为兽药监管部门提供技术支持，加强对兽药使用的监管力度，促使养殖户严格按照规定使用兽药，合理控制用药剂量和休药期，减少药物残留超标事件的发生，进而推动养鸡业的健康、可持续发展。同时，该检测方法的建立也有助于完善我国动物源食品中兽药残留检测体系，提高我国食品安全检测技术水平，与国际标准接轨，增强我国鸡肉产品在国际市场上的竞争力。

1.3国内外研究现状

在国外，对于地克珠利和妥曲珠利残留检测方法的研究开展较早。液相色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）凭借其高灵敏度和高选择性，成为了主流的检测手段。如[文献1]利用LC-MS/MS技术，对鸡肉、鸡肝等样品中的地克珠利和妥曲珠利进行检测，通过优化色谱条件和质谱参数，使两种药物能够得到良好的分离和准确的测定，该方法的检测限低至ng/kg级，能够满足欧盟等严格的食品安全标准对药物残留检测的要求。

在样品前处理方面，固相萃取（SPE）技术得到了广泛应用。[文献2]通过对SPE小柱的选择以及洗脱条件的优化，实现了对复杂基质中地克珠利和妥曲珠利的有效富集和净化，大大提高了检测的准确性和可靠性。同时，一些自动化的前处理设备，如全自动固相萃取仪的应用，不仅提高了工作效率，还减少了人为误差，使得检测结果更加稳定。

国内在这方面的研究也取得了显著进展。高效液相色谱（HPLC）结合紫外检测（UV）是较为常用的检测方法。[文献3]建立了一种HPLC-UV检测鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的方法，通过乙腈提取、正己烷脱脂等步骤对样品进行前处理，以特定比例的磷酸/三乙胺缓冲液和乙腈作为流动相，在合适的色谱条件下，实现了对两种药物的同时检测，该方法的回收率和精密度均能满足国内相关标准的要求。

此外，基质固相分散萃取（MSPD）技术在国内也有研究应用。[文献4]采用正交设计优化MSPD参数，建立了鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的MSPD方法，该方法将样品与固相填料充分混合研磨，使样品中的药物均匀分散在填料中，然后通过淋洗和洗脱步骤实现对药物的提取和净化，与传统的液-液萃取和SPE方法相比，具有操作简单、溶剂用量少、耗时短等优点。

然而，当前研究仍存在