DB13T 5625-2022 规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范.docxVIP

ICS65.020.30CCSB41

13

河北省地方标准

DB13/T5625—2022

规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范

2022-08-10发布2022-09-10实施

河北省市场监督管理局发布

DB13/T5625—2022

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由河北省农业农村厅提出。

本文件起草单位：河北省畜牧兽医研究所、河北省动物疫病预防控制中心、唐山市动物疫病预

防控

制中心。

本文件主要起草人：王晓芳、邵丽玮、徐华、郭建军、马宏伟、刘天驹、顾文源、符乐、孙凤莉、薄玉琨、李惠敬、邳明伟、刘嫣然、冯曼、刘泽、崔雪霞、李彦龙、张晓利。

DB13/T5625—2022

1

规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范

1范围

本文件规定了规模化奶牛场布鲁氏菌病的实验室检测、净化检测、净化标准和净化维持等技术要求。

本文件适用于规模化奶牛场布鲁氏菌病的净化，其他类型的奶牛场布鲁氏菌病净化可参考执行。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术

NY/T1467奶牛布鲁氏菌病PCR诊断技术

NY/T5049无公害食品奶牛饲养管理准则

《畜禽标识与养殖档案管理办法》（2006年农业部令第67号）《布鲁氏菌病防治技术规范》（农医发〔2007〕12号）

《病死及病害动物无害化处理技术规范》（农医发〔2017〕25号）3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4实验室检测

4.1血清学

4.1.1血清

4.1.1.1样品要求

血清来自布鲁氏菌病非免疫奶牛，使用A19疫苗皮下注射接种超过18个月或使用S2疫苗口腔喷服接种超过6个月的奶牛。

4.1.1.2检测方法

虎红平板凝集试验（RBT），试管凝集试验（SAT），间接酶联免疫吸附试验（i-ELISA），竞争酶联免疫吸附试验（c-ELISA），补体结合试验（CFT），按GB/T18646-2018执行。

对于不符合4.1.1.1要求的血清，采用琼脂凝胶免疫扩散试验（NH-GD）进行鉴别检测，方法见附录A。

4.1.2乳样

4.1.2.1样品要求

新鲜全乳或混合乳来自布鲁氏菌病非免疫奶牛，使用A19疫苗皮下注射超过18个月或使用S2疫苗口腔喷服接种超过6个月的奶牛，不得为初乳、脱脂乳、煮沸过的乳、冻结乳、腐败乳、酸化乳、乳房炎及其他乳房疾病患病牛的乳样。

4.1.2.2检测方法

采用全乳环状试验（MRT），按GB/T18646执行。4.2病原学

DB13/T5625—2022

2

4.2.1样品要求

流产胎儿可无菌采集胎衣、羊水、肝、脾、淋巴结、胃内容物等；流产母牛可无菌采集乳汁、阴道分泌物等。采样过程应当采取措施防止病原微生物扩散。

4.2.2检测方法

采用聚合酶链式反应（PCR），按NY/T1467执行。4.3感染判定

4.3.1对临床健康奶牛，采用RBT或i-ELISA、MRT中任一方法，检测结果阳性的判为疑似感染阳性。

4.3.2对临床健康奶牛，采用SAT、c-ELISA、CFT中任一方法检测结果阳性的，判为感染阳性。

4.3.3对免疫布鲁氏菌病疫苗未超过4.1.1.1中接种时间的临床健康奶牛，采用NH-GD检测结果阳性的，判为感染阳性。

4.3.4对流产母牛、流产胎儿，采用4.2.2检测结果阳性的，判定为病例。

5净化检测

5.1本底调查

按照预期感染率3%、置信度95%确定随机抽样数量，并根据泌乳牛、干乳牛、后备牛存栏数量按比例分配，覆盖到每个栋舍。

5.2技术路线

5.2.1牛群布鲁氏菌病感染率2%，循环检测，隔离淘汰患病牛或感染阳性牛。

5.2.2牛群布鲁氏菌病感染率≥2%，可接种布鲁氏菌疫苗，跟踪检测感染率2%后停止免疫，并按

5.2.1执行。

5.3方法组合

5.3.1串联检测对于感染率≥2%的奶牛群或在净化初期，采用i-ELISA或RBT、MRT方法检测初筛，结果阳性的样品采用c-ELISA或SAT、CFT方法检测确诊。推荐i-