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免疫球蛋白检验总结
一、免疫球蛋白检验概述
免疫球蛋白(Ig)是人体免疫系统的重要组成部分,包括IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五类。免疫球蛋白检验通过定量检测血液中的各类免疫球蛋白水平,为临床诊断、病情监测和疗效评估提供重要依据。
(一)免疫球蛋白检验的目的
1.评估免疫功能:判断机体是否存在免疫缺陷或免疫功能亢进。
2.诊断疾病:协助诊断自身免疫性疾病、感染性疾病等。
3.疗效监测:观察免疫治疗或药物干预的效果。
(二)免疫球蛋白检验的原理
1.免疫散射比浊法:利用抗原抗体反应产生的浊度变化,通过仪器定量检测。
2.免疫透射比浊法:通过抗体捕捉抗原,测量透光率变化进行定量。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA):通过酶标记抗体显色,计算浓度。
二、免疫球蛋白检验的临床意义
(一)各类免疫球蛋白的临床意义
1.IgG:
-正常范围:成人7.0~16.0g/L。
-增高:多发性骨髓瘤、慢性感染等。
-降低:原发性免疫缺陷病、重链病等。
2.IgA:
-正常范围:成人0.7~3.5g/L。
-增高:过敏性鼻炎、类风湿关节炎等。
-降低:选择性IgA缺乏症、肾病综合征等。
3.IgM:
-正常范围:成人0.5~2.5g/L。
-增高:病毒感染初期、多发性骨髓瘤等。
-降低:继发性免疫缺陷、长期使用免疫抑制剂等。
(二)免疫球蛋白联合检测的临床应用
1.免疫球蛋白比例异常:如IgG/IgA比例失调,提示免疫功能紊乱。
2.免疫复合物检测:IgG、IgA、C3联合检测,辅助诊断血管炎等疾病。
三、免疫球蛋白检验的操作流程
(一)样本采集与处理
1.采集静脉血3-5mL,使用肝素抗凝管。
2.避免溶血,立即混匀样本。
3.冷藏保存(2-8℃),4小时内完成检测。
(二)检验步骤(以免疫散射比浊法为例)
1.样本前处理:离心分离血清,去除脂血干扰。
2.试剂准备:校准仪器,确保抗体试剂活性。
3.定量检测:加入已知抗体,孵育30分钟,测量浊度变化。
4.数据分析:通过仪器软件计算免疫球蛋白浓度。
(三)质量控制措施
1.使用质控品每日校准,确保结果准确性。
2.定期进行室内质控,监测线性范围(如IgG线性范围可达0.5-20g/L)。
3.复测异常样本,排除操作误差。
四、免疫球蛋白检验的注意事项
(一)影响因素
1.服用药物:糖皮质激素可能降低免疫球蛋白水平。
2.感染状态:急性感染时IgM可能短暂升高。
3.样本质量:溶血或脂血干扰检测结果。
(二)结果解读要点
1.结合临床病史,避免单一指标误判。
2.儿童、老年人免疫球蛋白水平存在生理性波动。
3.重症疾病需动态监测,观察趋势变化。
五、免疫球蛋白检验的发展趋势
(一)技术进步
1.微流控芯片技术:实现快速定量检测(检测时间10分钟)。
2.串联质谱法:精准鉴定免疫球蛋白亚型。
(二)临床应用拓展
1.精准医疗:根据免疫球蛋白亚型指导个性化治疗。
2.预防医学:高危人群筛查与健康管理。
三、免疫球蛋白检验的操作流程
(一)样本采集与处理
1.样本采集规范:
选择合适的抗凝管:优先使用含有肝素锂或乙二胺四乙酸(EDTA)的抗凝管,具体选择需依据所使用的检测方法和试剂要求。肝素锂能有效抗凝且对免疫球蛋白测定干扰较小,EDTA则需确认其不干扰后续检测步骤。
采集方法:采用静脉穿刺法采集血液。确保采血过程无菌操作,避免皮肤污染影响结果。通常成人采集血量需满足检测及质控要求,一般3-5mL即可,具体量依仪器和项目而定。
采集时间与状态:建议在患者空腹状态下采集,避免进食高脂食物后导致的脂血干扰。检测时间尽量安排在采样后数小时内完成,以减少样本降解或成分变化。
2.样本处理要点:
及时分离:血液采集后应尽快通过离心(通常2000-3000rpm,离心5-10分钟)将血浆与血细胞分离。若检测对象为血清,则需在室温下静置30-60分钟使血液完全凝固,随后离心分离。
样本保存:分离后的血清或血浆应立即转移至干净、密封的样品管中,避免反复冻融。样本需根据检测要求在特定温度下保存,例如,大多数免疫球蛋白检测建议在2-8°C冰箱中保存,以稳定样本成分,防止酶活性或免疫系统自身成分反应影响检测。部分特殊样本或需要长期保存的样本,可能需要冷冻(如-20°C或-80°C)保存。
质量检查:在检测前,需目视检查样本是否出现明显溶血(样本变粉红色)、黄疸(样本呈黄色)或脂血(样本浑浊呈乳白色)。溶血和黄疸可能干扰检测,脂血可能影响某些比浊法检测,必要时需对脂血样本进行预处理(如离心分离上清)或选择不受影响的检测方法。
(二)检验步骤(以免疫散射比浊法为例)
1.仪器准备与
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