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阪崎肠杆菌O抗原的分子探秘:结构、基因与检测技术解析
一、引言
1.1研究背景与意义
阪崎肠杆菌(Enterobactersakazakii),现又称克罗诺杆菌属(Cronobacter),是一种在自然环境中广泛存在的革兰氏阴性杆菌,常见于水、土壤、植物根茎以及动物肠道之中,甚至在加工食品里也可能出现。该菌具有顽强的生命力,展现出耐寒、耐热、耐干燥、耐酸碱、耐渗透压以及耐紫外线的特性,对部分消毒杀菌剂也具备较强的抵抗能力。当处于不利条件时,它会分泌具有黏附性的多糖成分来保护自身,这使得一旦食品被其污染,便难以彻底清除。
阪崎肠杆菌作为一种食源性条件致病菌,对婴幼儿的健康构成了严重威胁,尤其是早产儿、出生体重偏低以及免疫力低下的婴幼儿群体。婴儿配方奶粉是目前发现的阪崎肠杆菌主要感染渠道,由于奶粉并非商业无菌产品,在配方奶粉加工环节,特别是干燥和罐装环节,极易受到阪崎肠杆菌的污染。阪崎肠杆菌比大肠杆菌具有更强的耐高渗透压能力,能够长时间在干燥的奶粉中存活,并且其耐热性较强,当使用低于70℃的水冲调奶粉时,多数阪崎肠杆菌依然能够存活。这就导致奶粉中即便仅有极微量的阪崎肠杆菌污染,在冲调、放置过程中也可能快速大量繁殖,进而引发婴儿感染。感染阪崎肠杆菌后,婴幼儿可能患上败血症、脑膜炎、坏死性小肠结肠炎等严重疾病,其中脑膜炎还可引发脑梗塞、脑脓肿和脑室脑炎等并发症,患者常常会遗留严重的神经系统后遗症,病死率高达40%-80%。国外文献报道显示,婴儿中约4%的脑膜脑炎病例是由阪崎肠杆菌引起的。
O抗原,通常是指某些革兰氏阴性细菌细胞壁外膜上的特异性多糖链,是细菌的抗原决定簇,能够诱导机体产生免疫应答。在细菌的分类和鉴定中,O抗原发挥着关键作用,是血清学分型的基础。不同的O抗原类型反映了细菌在进化过程中的差异以及遗传背景的不同,其化学组成和结构具有高度多样性。基因水平转移、重组和点突变等因素能使O-抗原血清型发生转变,获得位于细菌噬菌体或质粒上的O-抗原修饰基因也能导致细菌O-抗原血清型的差异。对于阪崎肠杆菌而言,其O抗原的研究同样至关重要。一方面,O抗原具有高度特异性,是细菌分类和鉴定的重要依据之一。通过对阪崎肠杆菌O抗原的分析,可以准确地对其进行分型鉴定,这有助于在食品检测、临床诊断等方面快速且准确地识别出该菌,避免因误判而延误对相关疾病的治疗或对食品安全问题的处理。另一方面,O抗原与细菌的毒力、致病性密切相关。深入研究阪崎肠杆菌O抗原,能够揭示其致病机制,为开发有效的防控措施提供理论基础。例如,了解O抗原如何参与细菌对宿主细胞的黏附、侵袭以及免疫逃避等过程,有助于研发针对性的药物或疫苗,阻断其致病途径,降低阪崎肠杆菌对婴幼儿健康的危害。此外,在流行病学调查中,O抗原分析可以用于追踪传染源和传播途径。通过对比不同地区、不同时间分离出的阪崎肠杆菌O抗原特征,能够确定疫情的传播范围和源头,为制定防控策略提供有力的数据支持,从而更有效地预防和控制阪崎肠杆菌感染事件的发生。
1.2阪崎肠杆菌概述
阪崎肠杆菌属于肠杆菌科,为革兰氏阴性杆菌,细胞大小约为0.6-1.1μm×1.2-3.0μm,无芽孢,兼性厌氧,借助周生鞭毛运动。其在自然界分布极为广泛,在水、土壤、植物根茎以及动物肠道等环境中均能被发现。在食品领域,从牛肉馅、香肠、干酪、蔬菜、谷物类、豆腐、莴苣、药草和调味料等多种食品中都成功分离出了阪崎肠杆菌。1988年,Muytjens等人对35个国家的140个食品进行抽查,结果发现有20例样品中存在阪崎肠杆菌,样品阳性率达14.2%,含量一般在0.36-66/100g。
阪崎肠杆菌作为一种食源性条件致病菌,对特定人群具有严重的健康威胁,尤其是免疫力低下的新生儿。自1961年首例由阪崎肠杆菌引起的脑膜炎病例被报道以来,全球范围内陆续出现多起由该菌引发的脑膜炎、败血症和坏死性小肠结肠炎病例。在我国,食品安全国家标准食品微生物学检验GB4789.40—2016对阪崎肠杆菌检测制定了明确规范,检测流程主要分为前增菌和增菌、分离、鉴定三个步骤。在分离菌种时,国际上常选用HiMedia公司生产的阪崎肠杆菌显色培养基(货号:MV1577),该培养基采用无疯牛病风险的植物蛋白胨取代动物蛋白胨,利用植物源成分,可有效分离出阪崎肠杆菌。
1.3O抗原在细菌学中的重要性
O抗原作为革兰氏阴性菌细胞壁外膜上的特异性多糖链,在细菌学领域具有举足轻重的地位。在细菌分类学中,O抗原是极为关键的分类指标。不同细菌种类或同一细菌的不同菌株,其O抗原的化学组成、结构以及抗原特异性存在显著差异,这使得O抗原成为区分细菌种类和菌株的重要依据。以大肠杆菌为例
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