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pcr上岗考试题及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的原理是？

A.碱基互补配对

B.转录

C.翻译

D.逆转录

2.PCR反应体系不包括？

A.引物

B.Taq酶

C.模板DNA

D.抗体

3.PCR循环的步骤不包括？

A.变性

B.退火

C.延伸

D.连接

4.引物设计的原则不包括？

A.长度合适

B.无互补

C.富含GC

D.特异性强

5.PCR产物的检测方法不包括？

A.凝胶电泳

B.测序

C.免疫组化

D.荧光定量

6.以下哪种不是PCR常见的用途？

A.基因克隆

B.疾病诊断

C.蛋白质合成

D.遗传分析

7.热启动PCR的目的是？

A.提高特异性

B.加快反应速度

C.降低成本

D.增加产量

8.实时荧光定量PCR主要用于？

A.定量分析

B.定性分析

C.突变检测

D.基因编辑

9.PCR反应中Mg2+浓度过高会导致？

A.特异性增强

B.非特异性扩增增加

C.反应速度减慢

D.无影响

10.引物的作用是？

A.提供模板

B.催化反应

C.引导合成

D.终止反应

答案：1.A2.D3.D4.C5.C6.C7.A8.A9.B10.C

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可用于？

A.病原体检测

B.亲子鉴定

C.肿瘤诊断

D.药物研发

2.以下属于PCR反应成分的有？

A.dNTP

B.缓冲液

C.模板RNA

D.引物

3.PCR循环参数包括？

A.温度

B.时间

C.循环次数

D.酶浓度

4.影响PCR扩增效果的因素有？

A.引物质量

B.Taq酶活性

C.模板浓度

D.反应体系污染

5.荧光定量PCR常用的荧光标记物有？

A.SYBRGreen

B.FAM

C.ROX

D.TAMRA

6.PCR技术的优势有？

A.灵敏度高

B.特异性强

C.操作简便

D.可定量

7.以下哪些是PCR产物的分析方法？

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.测序

D.质谱分析

8.热启动PCR可通过哪些方式实现？

A.抗体封闭Taq酶

B.化学修饰引物

C.高温孵育

D.降低反应体系温度

9.实时荧光定量PCR的优点包括？

A.准确快速

B.灵敏度高

C.可同时检测多个样本

D.无需电泳检测

10.PCR技术在哪些领域有广泛应用？

A.医学

B.农业

C.食品检测

D.环境监测

答案：1.ABCD2.ABD3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.AB9.ABCD10.ABCD

判断题（每题2分，共10题）

1.PCR只能扩增DNA。（）

2.引物浓度越高越好。（）

3.PCR反应必须在高温环境下进行。（）

4.实时荧光定量PCR可用于基因表达分析。（）

5.模板DNA纯度对PCR结果无影响。（）

6.PCR产物一定是目的片段。（）

7.热启动PCR可减少非特异性扩增。（）

8.Taq酶具有校对功能。（）

9.引物长度越长扩增效果越好。（）

10.PCR技术可用于病毒核酸检测。（）

答案：1.√2.×3.×4.√5.×6.×7.√8.×9.×10.√

简答题（总4题，每题5分）

1.简述PCR反应体系的主要成分及作用。

答：主要成分有模板DNA提供扩增模板；引物引导合成；dNTP提供原料；Taq酶催化反应；缓冲液维持反应环境。

2.影响PCR扩增特异性的因素有哪些？

答：引物特异性、模板纯度、Mg2+浓度、退火温度等，引物特异性差易非特异扩增，模板不纯引入杂质干扰，Mg2+浓度不当及退火温度不合适也会影响特异性。

3.实时荧光定量PCR的原理是什么？

答：在PCR反应体系中加入荧光基团，随着PCR产物增加，荧光信号强度与产物量成正比，通过检测荧光强度实现对起始模板定量分析。

4.简述PCR技术在疾病诊断中的应用。

答：可检测病原体核酸，如病毒、细菌等，辅助疾病诊断，还能用于肿瘤相关基因检测，如癌基因、抑癌基因等，为疾病诊断和病情监测提供依据。

讨论题（总4题，每题5分）

1.如何优化PCR反应条件以获得更好结果？

答：根据模板和引物优化退火温度，调整Mg2+浓度，确保引物质量