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环境微生物学实验指导

微生物学实验室规则

一、为保证实验顺利进行，实验室内应保持整洁，非必要的物品和书包，请勿带入室内；纸屑废棉花、火柴杆等应放入纸楼及废物缸内，不得随地乱扔。严禁在实验室内吸烟。

二、实验室内应保持安静，不要高声谈话、说笑；在进行实验时，应尽量避免在实验室内走动，以免染菌和影响他人做实验。

三、实验时，按规定的坐次入座；使用显微镜按固定镜号取用。使用完毕后，保持镜身洁净干燥，使用油镜头后，务必将镜头擦拭干净。

四、实验操作要细心谨慎，认真进行观察，及时做好实验记录。

五、实验台上各实验材料，在教师讲解前不要乱动；实验中需要培养的材料，应注名组别、名称及处理方法等，放到教师指定的地点进行培养。

六、进行高压灭菌时，应严格遵守操作规程。负责灭菌的人在灭菌过程中不准离开灭菌室。

七、爱护仪器，厉行节约，公用仪器、药品用完后放回原处，对显微镜、天平等贵重仪器要按要求操作。注意节约药品、水、电。如有仪器损坏，应立即报告老师，声明原因，填写报损单，由教师签署意见后按规定条例处理。

八、凡实验用过的菌种以及带有活菌的各种器皿，应先经高压灭菌后才能洗涤。制片上的活菌标本应先浸泡于3%来苏尔溶液或5%石炭酸溶液中0.5h后再行洗刷。如系芽孢杆菌或有孢子的霉菌，则应当延长浸泡时间。

九、实验过程中，如不慎将菌液洒到桌面或地面，应以5%石炭酸溶液或3%来苏尔溶液覆盖0.5h后才能擦去。如不慎将菌液吸入口中或皮肤破伤或烫伤，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。

十、实验完毕，应将仪器放回原处，擦净桌面，收拾整齐，由当班值日生将地面打扫干净，关闭实验室门、窗、灯、电等，并用肥皂洗手，方可离开实验室。

十一、每次实验结束，应以实事求是的态度填写实验报告，及时交给指导教师批阅。

环境微生物学实验

实验一显微镜的结构及使用技术

一、目的

显微镜是微生物学实验中最常用且必不可少的仪器之一，无论是观察微生物的个体形态结构还是测定微生物细胞大小都必须使用它。因此，只有正确了解显微镜的构造和原理，才能达到正确使用和保养的目的。本实验通过了解显微镜的构造、性能及原理，掌握显微镜的基本使用技术和保养方法，掌握显微镜观察及识别细菌基本形态的方法。

二、显微镜的种类、构造、基本原理及性能

(一)显微镜的种类

主要有普通显微镜、暗视显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜、扫描电子显微镜、扫描隧道显微镜等几个种类。其中普通显微镜最为常用，其它显微镜都是在此基础上发展而来的，基本结构相同。

(二)显微镜的构造

显微镜的构造包括机械和光学两部分，其各部构件名称如下：

1、机械部分：包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、推动器、粗调焦螺旋、细调焦螺旋。

镜座：是显微镜的底座，用以支撑整个显微镜。

镜臂：是携带或移动显微镜的把手。上连镜筒，下连镜座，用以支撑镜筒和镜座。

镜筒：是显微镜前方的空心圆筒，上端放置目镜，下端连接转换器，形成目镜和物镜的暗室，有单镜筒和双镜筒两种。

物镜转换器：在镜筒的基部，上面有3~4个圆孔，可安装不同放大倍数的物镜。转动转换器可以选择所需放大倍数的物镜。

载物台：载物台呈方形或圆形，是放置标本的平台，中央有一孔，为光线通路，台上有用来固定标本的夹子，台下有可移动载物台的十字推动器。

推动器(或称十字推动器)：附加在载物台上，是有一纵横两个推进齿轮的架子构成，用以移动标本的位置，以便将镜检对象移与视野中心。

粗调焦螺旋(粗调焦手轮)：是调节物镜和标本间距离的机件，螺旋向逆时针方

向转动，镜筒即上升，反之镜筒下降。有的显微镜是调整载物台上升或下降，顺时针旋转，载物台上升，反之载物台下降。

细调焦螺旋(细调焦手轮)：升降幅度极小，每转一周，镜筒(或载物台)上下移动0.1mm，可用来精确地校准焦距。

2、光学部分：又可分为放大和照明两个部分，前者包括物镜和目镜，后者包括反光镜、聚光器和虹彩光圈，有的还有特殊的光源部件。

目镜：在镜筒的上方，由两块透镜组成，它的作用是将来自物镜的影像作第二次放大形成虚象以供观察。目镜只能把物镜造成的像再次放大，没有辨析性能。目镜上标有放大倍数，一般显微镜有8×、10×、15×、20×等几种，在目镜中可粘入一根发丝作视野指针。因为目镜的口径尺寸都是统一的，可以根据需要互换使用。

物镜：是显微镜最重要的结构，由许多块透镜组成，不仅可以放大标本，而且具有辨析能力。在转换器上一般安装有4个物镜，即干燥系物镜和油浸系物镜，前者包括低倍物镜4×、10×和高倍物镜40×，使用时物镜和标本片之间的介质是空气；后者简称为油镜90~100×，使用时物镜和标本片之间的介质是诸如香柏油之类的油类物质。在物镜上一般标有两组数字，可反映其特性，如4