大肠菌群测定.pptVIP

大肠菌群测定演示文稿;优选大肠菌群测定Ppt;依据GB4789．3-2010，讨论若进行食品中大肠菌群的测定，需准备好哪些材料，且如何进行测定？;;食品中查出大肠菌群超标;由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。

中国采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制定的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。

国家标准

国家标准采用三步法，即乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。

乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。

证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。

报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN最大可能数表，报告每100mL（g）大肠菌群的MPN值。具体操作参见GB4789.3—94《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》

;原国家商检局制定的行业标准

原国家商检局制定的行业标准采用美国FDA的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。

推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。

证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告1mL(g)样品中大肠菌群的MPN值。

具体操作参见SN0169—92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》

;;材料;第一法大肠菌群MPN计数?

操作步骤?

6.1、样品的稀释

、固体和半固体样品：称取25g样品，放人盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，800or/min-10000r/min均质1min-2min，或放人盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min-2min，制成1:10的样品匀液。

、液体样品：以无菌吸管吸取25ml样品，置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分棍匀，制成1:10的样品匀液。

、样品匀液的pH值应在之间，必要时分别用1mol/L氢氧化钠（NaOH）或1mol/L盐酸（HCI）调节。

、用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1ml，沿管壁缓缓注人9ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支1ml无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。

;;当前12页，总共14页。;当前13页，总共14页。;谢谢大家！