探究bFGF与EGF浓度对体外视网膜色素上皮细胞增殖的剂量 - 时间效应.docxVIP

探究bFGF与EGF浓度对体外视网膜色素上皮细胞增殖的剂量-时间效应

一、引言

1.1研究背景与意义

视网膜作为眼睛内部至关重要的组织，是感光细胞的集合体，承担着将光信号转化为神经信号的关键职责，其功能的正常发挥是人类拥有清晰视觉的基础。视网膜色素上皮细胞（RPE）紧密排列于视网膜神经感觉层与脉络膜之间，虽仅为单层细胞结构，却在视网膜的生理功能维持中扮演着无可替代的角色。RPE细胞不仅能够为视网膜神经细胞提供必要的营养物质，如通过主动运输机制向视网膜输送葡萄糖、氨基酸等关键营养成分，保障神经细胞的能量供应和物质合成；还积极参与视网膜的代谢活动，例如对光感受器外节盘膜的吞噬和消化，维持光感受器的正常功能。同时，它还在维持视网膜内外环境的稳定方面发挥关键作用，通过离子泵和转运体调节视网膜下间隙的离子浓度和酸碱度，确保视网膜神经细胞处于适宜的微环境中。

一旦RPE细胞出现异常，将引发一系列严重的视网膜疾病。年龄相关性黄斑变性（AMD）便是其中典型的一种，在全球范围内，AMD已成为老年人不可逆性视力损害的主要原因之一。随着人口老龄化的加剧，AMD的发病率呈逐年上升趋势，给社会和家庭带来了沉重的负担。干性AMD主要表现为RPE细胞的进行性萎缩和玻璃膜疣的形成，导致视网膜功能逐渐衰退；湿性AMD则由于RPE细胞功能异常引发脉络膜新生血管形成，新生血管的渗漏和出血会严重破坏视网膜结构，迅速导致视力急剧下降。视网膜色素变性（RP）也是一种常见的因RPE细胞异常引发的遗传性视网膜疾病，以RPE细胞和光感受器细胞的进行性退化为特征，患者通常在儿童或青少年时期发病，最初表现为夜盲，随着病情进展，视野逐渐缩小，最终可导致失明。据统计，RP的全球发病率约为1/4000，目前尚无有效的根治方法。这些疾病不仅严重影响患者的生活质量，导致患者在日常生活中面临诸多不便，如行走困难、阅读障碍等，还对患者的心理健康造成极大的负面影响，增加了患者患抑郁症等心理疾病的风险。

细胞增殖对于RPE细胞在生理和病理状态下的功能维持与恢复至关重要。在生理状态下，RPE细胞的适度增殖有助于维持其细胞数量的稳定，保证视网膜功能的正常运行；在病理状态下，如视网膜受到损伤时，RPE细胞的增殖能力对于损伤修复起着关键作用。若RPE细胞增殖失控，可能引发增生性玻璃体视网膜病变（PVR）等严重并发症，PVR是导致视网膜脱离手术失败的主要原因之一，其发生机制与RPE细胞的异常增殖、迁移和纤维化密切相关。因此，深入研究RPE细胞的增殖调控机制具有重要的理论和实践意义。

生长因子作为一类对细胞的生长、增殖和分化具有重要调节作用的细胞因子，在RPE细胞的增殖调控中扮演着关键角色。碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和表皮生长因子（EGF）是其中研究较为广泛的两种生长因子。bFGF是成纤维细胞生长因子家族中的重要成员，它能够与细胞表面的特异性受体结合，激活细胞内的信号传导通路，如Ras/Raf/MEK/ERK通路和PI3K/Akt通路等，从而促进细胞的增殖、迁移和分化。在伤口愈合过程中，bFGF能够刺激成纤维细胞和内皮细胞的增殖和迁移，促进血管生成和肉芽组织形成，加速伤口的愈合。EGF则通过与表皮生长因子受体（EGFR）结合，激活下游的信号转导途径，如MAPK和PI3K信号通路，促进细胞的增殖和分化。在皮肤组织中，EGF能够刺激表皮细胞的增殖和分化，促进皮肤的修复和再生。大量研究表明，bFGF和EGF在RPE细胞的增殖调控中发挥着重要作用，但不同浓度的bFGF和EGF对RPE细胞增殖的影响尚未完全明确。

本研究旨在深入探究不同浓度的bFGF和EGF对体外培养的RPE细胞增殖的影响，通过系统地研究不同浓度的bFGF和EGF在不同作用时间下对RPE细胞增殖的影响，明确其剂量-效应关系和时间-效应关系，筛选出促进RPE细胞增殖的最佳浓度组合和作用时间。这不仅有助于深入揭示RPE细胞增殖的调控机制，丰富细胞生物学和眼科学的理论知识，为进一步研究视网膜疾病的发病机制提供重要的理论依据；还可能为视网膜疾病的治疗提供新的策略和方法，如开发基于生长因子调控的药物或细胞治疗方案，具有重要的临床应用前景，有望改善视网膜疾病患者的治疗效果和生活质量，减轻社会和家庭的负担。

1.2国内外研究现状

在国外，对bFGF和EGF与视网膜色素上皮细胞增殖关系的研究起步较早。早在20世纪80年代，就有学者开始关注生长因子在视网膜疾病中的作用。通过大量的细胞实验和动物模型研究，明确了bFGF和EGF在RPE细胞增殖调控中的重要地位。有研究运用基因敲除