艾滋病梅毒乙肝实验室检测技术.pptVIP

（优选）艾滋病梅毒乙肝实验室检测技术;

艾滋病抗体检测及样品处理

;二、筛查程序

初筛和复检流程（图1）

;当前第4页\共有40页\编于星期六\10点;三、筛查试验结果的报告

（建议用修改后附表3）（例）

HIV抗体筛查试验用附表1进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。

;四、HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程

1、适用范围

HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。

;2、检测程序;五、样品的处理

1样品的保存

用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。

2.样品的运送（例）

（1）应符合生物安全要求；

(2)应采用三层容器对样品进行包装。

;第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。

第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。

第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。

;当前第10页\共有40页\编于星期六\10点;;质量控制

;2、室内质控品

为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。作用：判断该批临床样品检测的有效性，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。

;二、统计室内质控的主要表示方法—建立质控图

最常用的质控图是Levey-Jennings质控图，下面以ELISA方法检测HIV抗体为例，描述建立质控图步骤：

;当前第15页\共有40页\编于星期六\10点;当前第16页\共有40页\编于星期六\10点;当前第17页\共有40页\编于星期六\10点;2、绘制质控图

（a）在常规条件下，对同一批血清连续测定20次（天）或以上，获得一组S/CO值，求均数（）和标准差（s）,超出2s或3s的数据不应删除。

（b）将均值（）和标准差（s）分别在质控框架图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴），每一批次试验作横座标（x轴），绘制质控图。

;（c）从第21次起，将每次质控血清的检测结果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。

;3、质控规则及其使用

质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，目前有许多质控规则，常用的是12S和13S规则。

（a）告警（12S）：当外部质控品的S/CO值超出+2s范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将12S做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。

;（b）失控（13S）：当外部质控品的S/CO值超出+3s范围时，系统处于失控状态，本次实验结果不能被接受，可能是系统误差、随机误差或外部质控品稳定性下降所致。

（c）漂移：连续几次（3～5次）外部质控品的S/CO值都落在均值的一侧则称为漂移，提示实验条件发生了较大的变化。

（d）趋势：连续几次（5～7次）外部质控品的S/CO值几乎按一个方向分布时称为趋势，通常由参数的缓慢改变引起。

;艾滋病实验室生物安全

;二、HIV相关检测的生物安全级别

HIV抗体检测应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。

;三、生物安全保证措施

1、建立安全制度

艾滋病检测实验室应建立下列安全制度

(1)实验室的安全工作制度或安全标准操作程序（S-SOP）。

(2)意外事故处理预案，主要是生物安全意外事故。

(3)信息安全及保密制度：（例）

;2、培训和管理

3、个人保健和防护

4、安全操作

5、实验室的清洁和消毒

工作完毕应对工作台面消毒，推荐用0.1～0.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；操作过程中如有样品、检测试剂外溅，应及时消毒。;如有大量高浓度的传染性液体溅出，在清洁之前应先用1%的次氯酸钠溶液浸泡，然后戴上手套擦净。离心样品时要使用密闭的罐和密封头，防止离心时液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。

;四、污染物处理

1、艾滋病实验室产生的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，经高压消毒后再进行处理或废弃。

;2、艾滋病检测实验室常用的消毒方法

（1）物理消毒方法

a高压蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;

b干燥空气烘箱消毒（干烤消毒），140℃，保持2～3h。

（2）化学消毒方法

含氯消毒剂（次