组织学与胚胎学.pptxVIP

动物组织学与胚胎学AnimalHistologyandEmbryology

主要解决：是什么（What）为什么（Why）怎么样（How）等问题绪论Introduction

动物组织学是应用各种显微技术及其它相关方法，研究动物机体的微细结构与其功能关系的科学,又称显微解剖学(microscopicalanatomy)。01动物胚胎学是应用形态学、生理生化学等的研究方法，探索并阐明动物机体的胚胎发育过程及其所需环境条件的科学。02研究内容包括细胞、基本组织、器官组织、家禽器官组织结构特点及哺乳动物、家禽胚胎学概论。03研究意义04一、概念、内容（What）及意义（Why）

03电镜结构/超微结构：电子显微镜下观察到的组织细胞内的结构。02光镜结构/显微结构：普通光学显微镜下观察到的组织细胞内的结构。011微米（μm）、纳米（nm）、埃（A，1A=1/10nm）度量单位：名词术语：

二、组织学与胚胎学发展简史是将拟观察材料预先制成切片、涂片、铺片、磨片标本，再用光镜进行观察的技术。包括徒手切片、石腊切片法、火棉胶切片法、冰冻切片法等，石腊切片法最为常用。三、组织学与胚胎学的研究方法（How）（一）光镜技术

石蜡切片法石蜡切片：paraffinsection固定fix切片section染色dye固定：将组织用化学试剂浸泡，使其蛋白质等成分凝固或沉淀,以保持其生活时的状态。染色：组织中某些成分与染料化学结合或物理吸附而显色。

各种切片

不同放大倍数下的组织

固定到切片（常用）固定01脱水-梯度乙醇02透明-二甲苯03透蜡-石蜡04包埋（---蜡块）05切片（5μm）06

切片到观察（常用）脱蜡-二甲苯入水-梯度乙醇染色脱水透明封片观察12

苏木精-伊红（HE）染色组织学、病理学最常用的染色方法。H：苏木精（Hematoxylin），碱性，蓝色E：伊红（eosin），酸性，（粉）红色嗜碱性:易于被碱性染料着染的性质。如:细胞核、核糖体（均含有核酸，酸性）。嗜酸性:易于被酸性染料着染的性质。如细胞质、胞外基质（内含碱性蛋白，碱性）。中性：与两种染料的亲和力都不强。0102

冰冻切片冰冻（常用液氮）01切片02优点：03保存酶活性，04抗原保存好，免疫组化应用较多。05缺点：06形态不如石蜡切片。07要求有冰冻切片机。08

????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????恒冷箱切片机恒冷箱切片机冷箱冷箱内切片刀及冷冻组织

01其他光镜可用方法：02简单，实用，无需特殊设备，有时候必须使用这些方法。涂片（血液，体液）铺片磨片。

透射电子显微镜(transmissionelectronmicroscope)

透射电子显微镜，示淋巴细胞超微结构黑色为高电子密度；灰色为低电子密度超微结构(ultrastructure)

高电子密度低电子密度透射电子显微镜

透射电镜－浆细胞超微结构

KYKY-2800B型数字化扫描电子显微镜

扫描电镜－血细胞

冷冻蚀刻复型术示细胞内面及细胞核表面超微结构

periodacidSchiffreaction，PAS反应PAS法显示肝细胞糖原

免疫组织化学immunohistochemistry免疫组织化学反应步骤示意图

原位杂交Insituhybridyzation

放射自显影术（autoradiograph)追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路。如将125I注入体内可观察碘在甲状腺内的碘化部位及过程;又如把3H标记的胸腺嘧啶苷或氨基酸注入体内，可以研究细胞内DNA合成及蛋白质合成及其代谢过程。还可对标本中银颗粒数目进行定量分析；也可用液体闪烁计数器对细胞或匀浆的放射强度进行定量研究。

图像分析（imageanalysis）肿瘤细胞分析/PT/qpzzfx.htm片组织分析/PT/zh.htm胞形态学分析/PT/zh.htm波球分析/PT/zh.htm墨颗粒分析彗星分析彩色目标选取/PT/zh1.htm光细胞分析细胞AgNORs分析

流式细胞术（flowcytometry,FCM）

组织或细胞培养tissueorcellculture培养瓶内的细胞培养96孔板内的细胞培养