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生物化学实验操作规范汇编

引言

生物化学实验是探索生命奥秘、揭示生命活动规律的重要手段，其操作的规范性、精密性与安全性直接关系到实验结果的可靠性、重复性，以及实验人员的人身安全与实验室环境的保护。本汇编旨在总结生物化学实验中通用的操作准则与关键注意事项，为实验操作者提供一套系统、实用的行为指南。无论是初涉实验室的新手，还是经验丰富的研究者，均应将规范操作内化为职业习惯，以严谨的科学态度对待每一个实验环节。

一、实验前准备与风险评估

1.1实验方案熟悉与预习

实验前必须仔细研读实验指导书或相关文献，明确实验目的、原理、步骤、预期结果及潜在风险。对于关键步骤和复杂仪器的操作，应提前查阅操作规程或向有经验人员请教，确保对整个实验流程有清晰的认知。

1.2个人防护装备（PPE）的正确穿戴

进入实验室必须按规定穿戴好个人防护装备，这是保障人身安全的第一道防线。

*实验服：应选择长袖、棉质或防静电材质，覆盖住日常衣物，扣好纽扣。实验服应专用于实验室，不得穿出实验室区域。

*防护眼镜/护目镜：在进行可能产生飞溅、喷溅（如离心管破裂、混匀剧烈反应液）或有刺激性气体产生的操作时，必须佩戴。

*手套：根据实验需求选择合适材质的手套（如乳胶、丁腈、PE手套等）。接触化学试剂、生物样本、放射性物质或进行细胞操作时必须佩戴。手套应及时更换，避免交叉污染或化学品渗透。

*其他：长发需束起，不佩戴外露首饰，不穿露趾鞋或凉鞋。必要时佩戴防护口罩、面罩或实验帽。

1.3实验台面与环境整理

*实验台面应保持清洁、整齐、干燥，仅放置实验所需的试剂、器材和记录本。

*实验区域禁止饮食、饮水、吸烟及进行其他与实验无关的活动。

*了解实验室应急设备（如洗眼器、紧急喷淋、灭火器、急救箱）的位置和使用方法。

1.4试剂与器材的检查

*试剂：仔细核对试剂名称、纯度级别、生产厂家、生产日期及有效期。注意观察试剂是否有变质、浑浊、沉淀、颜色异常等现象。对于剧毒、易制爆、易制毒等特殊试剂，需严格按照国家及实验室规定领用、登记和存放。

*器材：检查玻璃器皿是否有破损、裂缝；移液器、离心机等仪器是否处于良好工作状态，校准是否在有效期内。

1.5风险评估与应急预案

对于涉及有毒、有害、易燃、易爆、放射性或生物危害的实验，必须提前进行风险评估，并制定相应的应急预案。

二、实验中核心操作规范

2.1化学品安全操作

*“三不”原则：不尝、不直接闻（应采用扇闻法）、不轻易触摸未知化学品。

*标签清晰：所有试剂瓶必须有清晰、牢固的标签，注明试剂名称、浓度（如适用）、配制日期和配制人。不得使用无标签或标签模糊的试剂。

*取用规范：

*固体试剂：用药匙取用，避免用手直接接触。多余试剂不得倒回原瓶，以免污染。

*液体试剂：倾倒时，标签朝向手心，瓶口紧贴承接容器内壁或沿玻璃棒流下。使用滴管时，滴管不得伸入接收容器内部，更不能接触容器内壁或液面，用后立即洗净（滴瓶上的滴管除外）。

*挥发性、刺激性试剂应在通风橱内操作。

*混合与稀释：稀释浓硫酸等放热试剂时，应将试剂缓慢加入水中，并不断搅拌，严禁将水加入浓硫酸中。

*防止交叉污染：不同试剂的取用工具应专用，避免混用。移液时，移液器吸头（tip）应一次性使用。

2.2实验仪器的规范使用

*通用原则：使用任何仪器前，务必仔细阅读操作规程，熟悉其性能、操作方法及注意事项。首次使用或对仪器不熟悉时，须在指导下进行。

*天平：

*保持水平，定期校准。

*称量前检查天平是否清洁，归零。

*称量物需置于称量纸、称量舟或容器内，不得直接置于称量盘上。易挥发、腐蚀性物质应在密闭容器中称量。

*称量时动作轻缓，避免过载。称量完毕，清洁天平，关闭电源。

*移液器：

*根据所需体积选择合适量程的移液器，调节体积时注意量程限制，避免超出范围损坏仪器。

*安装吸头时应紧密套合，避免漏气。

*吸取液体时，缓慢松开拇指，避免液体吸入移液器内部。排放液体时，贴壁，按至第一停点后稍作停顿，再按至第二停点（视具体情况和吸头类型而定）。

*使用后调回最大量程，垂直放置于移液器架上。

*离心机：

*离心管需平衡，重量偏差应在仪器允许范围内。对称放置。

*盖紧离心机盖后方可启动。运行过程中不得打开盖子或进行其他操作。

*离心结束，待转子完全停止后方可打开盖子取出样品。

*如有液体溢出，应立即停机，彻底清洁转子和离心腔，必要时消毒。

*分光光度计/酶标仪：

*开机预热，选择合适波长。

*使用匹配的比色皿，手持毛面，避免污染光学面。比色皿外壁需擦拭干净，无气泡。

*以空白溶