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概述
色谱分离过程的基本原理
色谱的分类
色谱分离过程基础理论
色谱技术的应用
;1.概述-发展;色谱法于二十世纪五十年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。
1952年英国科学家阿切尔·马丁、理查德·辛格因发明了分配色谱法而共同获得诺贝尔化学奖,此外色谱分析方法还在12项获得诺贝尔化学奖的研究工作中起到关键作用。;1.概述-色谱分离的特点;2.色谱分离过程的基本原理;分离原理;常用的固定相(色谱柱填料);硅胶:应用广泛,适合各类成分
氧化铝:主要用于碱性或中性亲脂性成分,如生物碱、甾体、萜类等
活性炭:用于水溶性氨基酸、糖类及苷类
聚酰胺:主用于酚类、醌类如黄酮类、蒽醌类及鞣质等成分;3.色谱的分类;;吸附色谱;;;离子交换树脂法;大孔吸附树脂;当前16页,总共70页。;分配色谱;4.色谱分离过程理论基础;4.色谱分离过程理论基础;4.色谱分离过程理论基础-保留值;峰宽Wb:色谱峰拐点处的两条切线与基线的两个交点之间的距离;
半峰宽Y1/2:峰高一半处对应的峰宽,为2.35?;
相邻色谱峰峰顶之间的距离除以此二色谱峰的平均宽度。用R表示:;;柱效率
实际工作中,塔板数的计算用下列公式:
而理论塔板数的计算公式为:
n=L/H
其中L为色谱柱的柱长;H为理论板高度。;考虑到组分在死时间内不参与柱内分配,用调整保留时间代替保留时间,得有效塔板数和有效塔板高度:;5.色谱分离的应用;5.色谱分离的应用;1938年俄国人首先实现了在氧化铝薄层上分离一种天然药物。1965年德国化学家Stahl出版了“薄层色谱法”一书,推动了这一技术的发展。
因TLC法设备简单,分析速度快,分离效率高,结果直观,很快被用作定性和半定量的方法。
70年代中后期发展了高效薄层色谱。80年代以后发展了薄层色谱光密度扫描仪,和各步操作的仪器化,并实现了计算机化。
薄层层析流动相的移动是依靠毛细作用。
;当前28页,总共70页。;比移值(Rf值):用来表征斑点位置的基本参数是保
留因子,通常称作比移值,用Rf表示。;显色方法;;优点:
设备简单、操作方便、运行费用低;
分离时间短,工作效率高;
展???剂选择范围广,展开方式多样;
显色方便,检测手段丰富;
既可分析,又可制备;
试样一般不需要经过严格预处理即可分离。
缺点:
分离效率较低;不适用挥发性试样分离;定性定量不便。;TLC的应用;5.色谱分离的应用;1953年阿切尔·马丁和A.T.詹姆斯发明了气相色谱法。;GC:以气体(即载气)为流动相的柱色谱
分离技术。
GC中常用作的载气的气体有N2、He、H2、
Ar,均为惰性气体。
GC载气的功能仅仅是携带试样、洗脱组分。
GC的选择性主要取决于固定相和组分分子
间的作用,所以可通过改变固定相来改变
GC的选择性。;气相色谱仪流程(图);样品;进样系统;柱温的选择;对检测器的要求;噪声和漂移;GC的特点;5.色谱分离的应用;高效液相色谱仪;高效液相色谱仪流程(图);贮液器;流动相脱气的方法;HPLC用水;流动相溶剂的要求;洗脱方式;HPLC色谱柱类型;化学键合相;评价色谱柱好坏的标准;拖尾因子Tf;对理想检测器的要求;常用检测器;紫外检测器(UV);荧光检测器(FD);示差折光检测器(RID);蒸发光散射检测器(ELSD);检测器比较;HPLC定性、定量分析;HPLC与GC比较;5.色谱分离的应用;典型制备色谱;模拟移动床色谱(SMB);;模拟移动床色谱(SMB);谢谢大家!
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