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核酸的生物合成;复制(replication)是指以原来DNA分子为模板,合成出相同DNA分子的过程;
转录(transcription)是以DNA分子为模板合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA的过程;
翻译(translation)是在由rRNA和蛋白质组成的核糖核蛋白体(简称核糖体)上,以mRNA为模板,根据每3个相邻核苷酸决定一种氨基酸的三联体密码规则,由tRNA运送活化的氨基酸,GTP提供所需能量,合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过程。
;第一节DNA的生物合成;一、半保留复制
在DNA复制时,亲代DNA的双螺旋先行解旋和分开,然后以每条链为模板,按照碱基配对原则,在这两条链上各形成一条互补链。这样,从亲代DNA的分子可以精确地复制成2个子代DNA分子。每个子代DNA分子中,有一条链是从亲代DNA来的,另一条则是新形成的,这叫做半保留复制。
;第五页,共54页。;第六页,共54页。;(一)复制的起始点与方向
DNA分子复制时,在亲代分子一个特定区域内双链打开,随之以两股链为模板复制生成两个子代DNA双链分子。开始时,复制起始点呈现一叉形(或Y形),称之为复制叉(replicationfork)。复制进行中,复制叉乃向前移动。
;1.复制的起始点
DNA复制要从DNA分子的特定部位开始,此特定部位称为复制起始点(originofreplication),可以用ori表示。在原核生物中复制起始点常位于染色体的一个特定部位,即只有一个起始点。真核生物的染色体是在几个特定部位上进行DNA复制的,有几个复制起始点的。
;2.复制的方向
;(二)DNA聚合反应有关的酶及相关蛋白因子
DNA的合成是以四种三磷酸脱氧核糖核苷为底物的聚合反应,该过程除了需要酶的催化之外,还需要适量的DNA为模板,RNA(或DNA)为引物和镁离子的参与。
;1.引物合成酶
引物合成酶亦称引发酶(primerase),此酶以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA的引物(Primer)。
;2.DNA聚合酶
在大肠杆菌中发现有3种DNA聚合酶,分别称为DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。DNA聚合酶Ⅰ是多功能酶,它具有5′→3′聚合酶,5′→3′外切酶及3′→5′外切酶的活性。它的主要功能是对DNA损伤的修复???以及在DNA复制时,RNA引物切除后,填补其留下的空隙。
;DNA聚合酶Ⅲ极为复杂,具有5′→3′DNA聚合酶活性。具有3′外切酶的校对功能,提高DNA复制的保真性。现在一般认为,DNA聚合酶Ⅲ是原核生物DNA复制的主要聚合酶。
;3.真核细胞的DNA聚合酶
;4.DNA连接酶
作用是催化双链DNA中的切口处的相邻5′-磷酸基与3′-羟基之间形成磷酸酯键。但是它不能将两条游离的DNA单链连接起来。
;5.拓扑异构酶
拓扑异构酶Ⅰ可减少负超螺旋;拓扑异构酶Ⅱ可引入负超螺旋,它们协同作用控制着DNA的拓扑结构。拓扑异构酶在重组、修复和DNA的其它转变方面起着重要的作用。
;6.解螺旋酶
通过水解ATP将DNA的两条链打开。ATP水解活力要有单链DNA存在。
;7.其它蛋白因子
(1)单链结合蛋白,它的功能是稳定已被解开的DNA单链,阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。
(2)引发前体,与RNA引物合成酶(引发酶)结合,组装成引发体。引发体结合到随后链的模板上,具有识别合成起始位点的功能。
;(三)DNA的复制过程
DNA的复制按一定的规律进行,双螺旋DNA是边解开边合成新链的。复制从特定位点开始,可以单向或双向进行,但是以双向复制为主。由于DNA双链的合成延伸均为5′→3′的方向,因此复制是以半不连续的方式进行,即其中一条链相对地连续合成,称之为领头链,另一条链的合成是不连续的,称为随后链。在DNA复制叉上进行的基本活动包括双链的解开;RNA引物的合成;DNA链的延长;切除RNA引物,填补缺口,连接相邻的DNA片段。
;1.双链的解开
复制是从DNA分子的特定位置开始的,这一位置叫复制原点,常用ori表示。许多生物的复制原点都是富含A、T的区段。
;2.RNA引物的合成
引发酶与引发前体结合形成引发体。引发体在复制叉上移动,识别合成的起始点,引发RNA引物的合成。移动和引发均需要由ATP提供能量。以DNA为模板按5′→3′的方向,合成一段引物RNA链。引物长度约为几个至10个核苷酸。在
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