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Fshr基因缺失介导雌性小鼠抑郁样行为的分子机制与神经通路解析

一、引言

1.1研究背景

抑郁症是一种常见的精神障碍性疾病，严重影响患者的身心健康和生活质量，给社会和家庭带来沉重负担。据世界卫生组织（WHO）报告，全球约有3.5亿人受抑郁症困扰，且抑郁症的患病率呈上升趋势。抑郁症不仅导致患者情绪低落、兴趣减退、自责自罪等精神症状，还常伴有睡眠障碍、食欲改变、疲劳乏力等躯体症状，严重者甚至出现自杀行为，是导致自杀的主要原因之一。

近年来，研究发现Fshr基因在抑郁症的发生发展中可能发挥重要作用。Fshr基因编码促卵泡激素受体（Follicle-stimulatinghormonereceptor，FSHR），该受体主要表达于生殖系统，在卵泡发育、排卵以及精子生成等生殖过程中发挥关键作用。然而，越来越多的研究表明，FSHR在中枢神经系统等非生殖组织中也有表达，提示Fshr基因可能通过非生殖途径参与抑郁症等精神疾病的病理生理过程。

雌性在抑郁症的发病率明显高于雄性，这种性别差异的机制尚不完全清楚。雌性小鼠在生殖生理和激素水平变化等方面与女性具有相似性，如动情周期中雌激素和孕激素水平的周期性波动。因此，以雌性小鼠为研究对象，探讨Fshr基因缺失引起雌性小鼠抑郁样行为的机制，对于揭示抑郁症性别差异的分子机制具有重要意义。

1.2Fshr基因的功能概述

Fshr基因位于染色体2p16.3，是Glycoproteinhormonereceptors家族的一员，其编码的促卵泡激素受体（FSHR）是一种跨膜蛋白，属于G蛋白偶联受体超家族。在生殖系统中，FSHR在女性的卵巢和男性的睾丸中均有表达。在女性卵巢中，FSHR与垂体分泌的促卵泡激素（FSH）结合，激活一系列细胞内信号通路，促进卵泡的生长、发育和成熟，调节雌激素和孕激素的合成与分泌，对于正常的月经周期和生育功能至关重要。在男性睾丸中，FSHR参与精子的生成过程，对维持男性生殖功能起着关键作用。

除了在生殖系统中的重要功能外，越来越多的研究发现FSHR在非生殖组织中也有表达，如脂肪组织、肝细胞、成骨细胞和神经细胞等。在脂肪组织中，FSHR可能参与脂肪代谢和能量平衡的调节；在肝细胞中，FSHR的表达与肝脏的脂质代谢和糖代谢相关；在成骨细胞中，FSHR对骨的生长、发育和重塑具有一定的调节作用。在中枢神经系统中，FSHR主要表达于海马、杏仁核、前额叶皮质等与情绪调节密切相关的脑区，提示Fshr基因可能通过调节这些脑区的神经功能参与情绪行为的调控。然而，Fshr基因在非生殖组织中的具体作用机制仍有待进一步深入研究。

1.3研究目的与意义

本研究旨在通过构建Fshr基因缺失的雌性小鼠模型，综合运用行为学、分子生物学、神经生物学等多学科技术手段，系统深入地探讨Fshr基因缺失引起雌性小鼠抑郁样行为的分子机制和神经生物学基础。

本研究具有重要的理论意义，有助于揭示Fshr基因在抑郁症发病机制中的作用及分子调控网络，为深入理解抑郁症的病理生理过程提供新的视角和理论依据，丰富和完善抑郁症的神经生物学理论体系。同时，研究成果对于开发基于Fshr基因靶点的抑郁症新型诊断标志物和治疗策略具有重要的临床指导意义，有望为抑郁症的精准诊断和个性化治疗提供新的思路和方法，从而提高抑郁症的治疗效果，改善患者的生活质量，减轻社会和家庭的负担。

二、实验材料与方法

2.1实验动物

实验选用SPF级C57BL/6雌性小鼠，购自[供应商名称]，小鼠年龄为8-10周，体重20-25g。小鼠饲养于温度（22±2）℃、相对湿度（50±10）%的动物房内，采用12h光照/12h黑暗的循环光照制度，自由摄食和饮水。

Fshr基因敲除小鼠通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建。具体步骤如下：针对小鼠Fshr基因的特定外显子设计sgRNA序列，将sgRNA表达载体与Cas9表达载体共同显微注射到C57BL/6小鼠受精卵的细胞质中，然后将注射后的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管内，使其发育成F0代小鼠。通过PCR及测序鉴定F0代小鼠的基因型，筛选出Fshr基因敲除阳性小鼠。将F0代阳性小鼠与野生型C57BL/6小鼠交配，获得F1代杂合子小鼠。再将F1代杂合子小鼠相互交配，通过基因型鉴定筛选出F2代Fshr基因敲除纯合子小鼠。实验中设立野生型C57BL/6雌性小鼠作为对照组，Fshr基因敲除雌性小鼠作为实验组，每组各10只。

2.2主要实验试剂与仪器

实验中用到的主要试剂及仪器如下：

类别

名称

用途

来源或生产厂家

试剂

TRIzo