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病毒学样本采集细则
一、概述
病毒学样本采集是传染病诊断、监测和溯源的关键环节。规范的样本采集流程有助于确保样本质量,提高病毒检测的灵敏度和特异性。本细则旨在为病毒学样本采集提供标准化操作指导,涵盖样本类型、采集方法、保存运输及注意事项等内容。
二、样本类型及适应症
(一)呼吸道样本
1.适用于流感、冠状病毒等呼吸道病毒检测。
2.常用样本类型包括:鼻拭子、咽拭子、深咳痰液。
3.采集要点:
(1)鼻拭子采集需深入鼻腔后部黏膜;
(2)咽拭子需在咽喉部旋转擦拭;
(3)痰液采集需避免唾液污染。
(二)粪便样本
1.适用于诺如病毒、轮状病毒等肠道病毒检测。
2.采集要点:
(1)使用无菌容器收集新鲜粪便约3-5克;
(2)避免尿液污染;
(3)采集后立即密封保存。
(三)血液样本
1.适用于乙型肝炎、艾滋病等病毒血清学检测。
2.采集要点:
(1)采用EDTA抗凝管采集静脉血3-5毫升;
(2)避免溶血;
(3)标本需在室温下静置30分钟后再离心。
三、采集方法及操作流程
(一)鼻拭子采集步骤
1.准备工作:
(1)检查采样工具是否无菌、完好;
(2)消毒采样人员手部。
2.采集操作:
(1)患者取坐姿,头稍前倾;
(2)采样人员将拭子深入鼻腔后部旋转5次;
(3)取出拭子后立即放入含病毒的保存液中。
(二)咽拭子采集步骤
1.准备工作:
(1)告知患者张口发“啊”音;
(2)检查拭子是否预湿润。
2.采集操作:
(1)将拭子贴附咽喉两侧黏膜;
(2)旋转擦拭3-5次;
(3)放入保存液混匀。
(三)粪便样本采集步骤
1.准备工作:
(1)提供一次性手套和洁净容器;
(2)指导患者避免尿液污染。
2.采集操作:
(1)使用无菌棉签蘸取粪便边缘;
(2)置于容器中并加盖;
(3)标记样本信息。
四、样本保存与运输
(一)保存条件
1.病毒保存液建议使用含0.5%福尔马林的磷酸盐缓冲液(PBS);
2.样本需在4℃条件下保存,运输时间不超过24小时;
3.血清样本可置于-20℃冷冻保存。
(二)运输要求
1.使用密封防漏的采样袋;
2.填写样本交接单,注明采集时间、类型及检测项目;
3.确保运输过程中温度稳定。
五、注意事项
1.采样人员需佩戴一次性手套和口罩,操作前后消毒双手;
2.样本容器应清晰标记,避免混淆;
3.采集过程中避免交叉污染,每次更换患者需重新消毒工具;
4.异常情况(如样本溶血、污染)需立即记录并重新采集。
六、质量控制
1.定期检查采样工具的灭菌效果;
2.样本检测前需复核保存条件是否达标;
3.建立样本盲法复核机制,确保检测准确性。
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(续前文)
六、注意事项(续)
1.采样人员需佩戴一次性手套和口罩,操作前后消毒双手;
(1)操作前:使用含70-80%酒精的消毒湿巾或手消毒剂彻底清洁双手,确保指甲缝无污垢残留。
(2)操作中:若手部接触样本污染区域或可疑污染物,需立即重新消毒。
(3)操作后:脱掉一次性手套,按照规定流程丢弃,再用消毒湿巾或手消毒剂清洁双手,或使用流动水洗手并肥皂搓洗至少20秒。
2.样本容器应清晰标记,避免混淆;
(1)标记内容:必须包括但不限于样本编号、采集日期与时间(精确到小时)、样本类型(如鼻拭子、咽拭子、粪便等)、采集人员姓名或工号、患者信息(如姓名、性别、年龄,注意保护隐私时可使用编码)、检测项目名称。
(2)标记方式:使用防水、耐热的标记笔或专用标签,确保信息字迹清晰、牢固,不易脱落或模糊。
(3)标记位置:标签应粘贴在容器的侧面,位置便于识别且不易被内容物遮挡。
3.采集过程中避免交叉污染,每次更换患者需重新消毒工具;
(1)工具消毒:在采集下一个患者样本前,必须使用有效的消毒剂(如70-80%酒精或含氯消毒液)彻底消毒采样工具的接触部分。对于可重复使用的非无菌部分(如采样杆),需按照设备说明进行灭菌处理(如高压蒸汽灭菌)。
(2)环境消毒:若在固定地点进行批量采样,应在采集完一个患者后对操作台面、桌面等进行清洁和消毒。
(3)流程规范:采样人员应使用独立的无菌包装进行每位患者的样本采集,避免不同患者样本容器之间的直接接触。
4.异常情况(如样本溶血、污染)需立即记录并重新采集;
(1)异常识别:
(a)溶血:血液样本若出现明显红色或粉红色浑浊,提示可能溶血。需记录样本状态。
(b)污染:若怀疑样本被其他样本或环境物质污染(如容器外有渗漏、鼻拭子接触非目标部位等),需视为无效样本。
(c)样本不合格:包括样本量不足、保存不当(如已冻融多次)、或采集时间过长等。
(2)处理流程:
(a)立即记录:在样本标签或记录单上清晰注明异
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