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临床微生物学标本的采集

临床微生物检验流程示意临床标本留取环节一运送实验室环节二分析前分析中标本合格？环节三接种培养检测门诊病房不合格合格环节四环节五分析后报告环节六SOPEQCIQC培养基、冰箱温箱、气体直接检测仪器设备、试剂EQA标本标本合格判定SOP对每个环节进行控制，构成质量保证体系+

失误的不同分布

分析前阶段约占总失误的55%，分析阶段约占总失误的4%，分析后阶段约占总失误的41%。4%41%55%

标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，因此在标本采集、送检、保存等各个环节都要规范操作，严格控制，是确保实验结果准确可靠的前提。PARTONE

早期采集：采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时，而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集。标本采集的一般原则：

无菌采集：采集的标本应无外源性污染。在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作；对于与外界相通的腔道，如窦道标本应由窦道底部取活组织检查，而不应从窦道口取标本，以免受皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊；

采集的标本均应盛于无菌容器内，盛标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或用一次性无菌容器，而不能用消毒剂或酸类处理。PARTONE

根据目的菌的特性用不同的方法采集：厌氧菌、需氧或兼性厌氧菌，以及L型菌采用的方法不同。如尿液标本，疑为厌氧菌感染时，应以无菌注射器从耻骨上缘行膀胱穿刺术抽取；若怀疑是需氧或兼性厌氧菌的感染，可通过自然导尿获取标本。

采集适量标本：采集量不应过少，而且要有代表性，同时有些标本还要注意在不同时间采集不同部位标本。如伤寒副伤寒患者，发病的第1周应采集血液，第2周应采集粪便和尿液，否则影响细菌检出率。

安全采集：采集标本时不仅要防止皮肤和黏膜正常菌群对标本的污染，同时也要注意安全，防止传播和自身感染。

一上呼吸道标本

标本采集方法：

嘱患者先用清水漱口，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引,用压舌板将舌向下向外压，用无菌棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧,反复擦拭数次然后送检，拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液。

标本采集注意事项：采集时间：应于抗生素应用之前。时间上可无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，应晨起后采集为佳。

送检：应立即送检。

二下呼吸道标本

标本质量脓痰粘液样痰唾液or诱导痰(?)血痰

用革兰氏染色来评估

呼吸道标本是否合格

痰标本10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收

白细胞25个/每低倍视野，鳞状上皮细胞10个/低倍视野为合格标本

标本采集方法自然咳痰法：晨痰为佳，用温开水漱口数次（为减少口腔正常菌群污染标本），深咳呼吸道深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10％Nacl水溶液，使痰液易于排出。

胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。支气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取。

气管穿刺法：主要用于厌氧菌培养

小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。

注意事项：

晨痰为好。多数病人清晨痰较多，易于采集，且清晨痰含有的病理成分较多，会增加培养的阳性率。

有1/4-1/2肺部感染患者可能发生菌血症，应同时作血培养。

在抗菌药物应用之前采集标本。

标本采集后应2小时内送检，否则可暂存于4℃冰箱，最长不超过24小时（但是肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等苛氧菌不喜低温，怀疑其感染者切勿冷藏）。痰培养连续3-4次有意义，每次间隔大于24小时。支气管镜纤刷物和肺泡灌洗液取出后及时送检。

三尿液标本

标本的采集方法：清洁中段尿标本，晨尿为佳，嘱咐患者睡前少饮水，保证与上次排尿时间间隔4小时以上。女性采样前用清水冲洗外阴部及尿道口，男性须翻转包皮冲洗，用清水冲洗尿道口，然后收集标本，方法是排尿弃去前段尿，无中断尿流时收集10ml中段尿于无菌容器内送检。于2小时内送检。

该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。

耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。

直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况，但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。

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