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生物技能竞赛题库及答案

一、选择题（每题2分，共20分）

1.PCR反应体系中，下列哪种酶是必需的？

A.DNA聚合酶I

B.DNA聚合酶II

C.DNA聚合酶III

D.TaqDNA聚合酶

2.在细胞培养中，下列哪种成分不是基础培养基的必需成分？

A.氨基酸

B.维生素

C.葡萄糖

D.血清

3.下列哪种显微镜能够观察活细胞内部结构且不需要染色？

A.明场显微镜

B.荧光显微镜

C.相差显微镜

D.电子显微镜

4.琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，DNA分子迁移速率与下列哪项因素无关？

A.DNA分子大小

B.琼脂糖凝胶浓度

C.电场强度

D.DNA分子构型

5.下列哪种方法可以用于纯化蛋白质？

A.凝胶过滤层析

B.离子交换层析

C.亲和层析

D.以上都是

6.在微生物培养中，平板划线分离法的主要目的是：

A.增加微生物数量

B.分离纯化微生物

C.观察微生物形态

D.测定微生物生长曲线

7.下列哪种技术可以用于检测基因表达水平？

A.Southernblot

B.Northernblot

C.Westernblot

D.Easternblot

8.PCR反应中，引物设计应遵循的原则不包括：

A.长度一般为18-30个核苷酸

B.G+C含量应在40%-60%之间

C.引物之间不应有互补序列

D.引物3端应含有多个G或C

9.流式细胞术主要用于：

A.细胞计数

B.细胞分选

C.细胞周期分析

D.以上都是

10.下列哪种试剂常用于固定组织切片？

A.甲醛

B.乙醇

C.丙酮

D.乙醚

二、填空题（每空1分，共20分）

1.生物安全实验室分为________级，其中最高级别为________级。

2.PCR反应的三个基本步骤是________、________和________。

3.细胞培养中，细胞系分为________和________两大类。

4.离心机根据转速可分为低速离心机、________和________。

5.凝胶电泳中，DNA向________极移动，RNA向________极移动。

6.蛋白质定量测定方法中，________法是最灵敏的方法之一。

7.微生物培养基根据用途可分为基础培养基、________和________。

8.基因工程中，常用的限制性内切酶分为________类和________类。

9.PCR产物纯化常用的方法有________、________和柱纯化法。

10.生物信息学中，BLAST是一种用于________的工具。

三、判断题（每题1分，共10分）

1.PCR反应中，退火温度越高，特异性越高，但产物产量可能降低。

2.细胞培养中，所有细胞都需要在5%CO2条件下培养。

3.离心机使用前必须平衡，否则可能损坏设备或造成危险。

4.琼脂糖凝胶电泳中，凝胶浓度越高，小分子DNA迁移越快。

5.Westernblot用于检测DNA分子。

6.流式细胞术可以同时检测多个细胞参数。

7.细胞冻存时，应缓慢降温以减少冰晶形成对细胞的损伤。

8.限制性内切酶识别序列通常为4-8个碱基对的回文序列。

9.生物安全柜操作时，应保持窗口处于适当高度，以保证气流平衡。

10.基因芯片技术可以同时检测成千上万个基因的表达情况。

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR反应的基本原理及其主要应用领域。

2.什么是细胞原代培养和传代培养？简述两者之间的区别。

3.简述Westernblot的基本原理和主要步骤。

4.简述微生物无菌操作的基本原则。

五、实验操作题（每题10分，共20分）

1.设计一个实验方案，从血液样本中提取基因组DNA并进行PCR扩增，检测特定基因的突变情况。

2.设计一个实验方案，用于分离和纯化一种重组蛋白，包括纯化方法的选择和纯度鉴定的方法。

六、综合分析题（每题10分，共20分）

1.某实验室在进行PCR实验时，出现非特异性扩增条带，请分析可能的原因并提出解决方案。

2.某研究团队计划开展一项涉及人类胚胎干细胞的研究，请从生物安全和伦理角度分析该研究需要考虑的问题。

答案：

一、选择题

1.D.TaqDNA聚合酶

解释：PCR反应需要一种耐热的DNA聚合酶，TaqDNA聚合酶是从嗜热菌Thermusaquaticus中分离的，能够耐