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耐低温反硝化菌的筛选鉴定与脱氮特性及机制研究

一、引言

1.1研究背景

随着工业化和城市化进程的快速推进，水污染问题愈发严峻，其中水体氮污染已成为全球关注的焦点。氮素作为生物生长的重要营养元素之一，一旦在水体中过量积累，会引发一系列严重的环境问题，水体富营养化便是其中最为突出的表现。在富营养化的水体中，藻类及其他浮游生物会大量繁殖，消耗水中的溶解氧，致使水质恶化，水生生物的生存环境遭受严重威胁，生物多样性锐减。与此同时，水中过量的氮，尤其是亚硝酸盐，可能通过食物链进入人体，对人类健康构成潜在危害，如增加患癌症的风险。

目前，水体氮污染的来源极为广泛，涵盖了工业废水排放、农业面源污染以及生活污水排放等多个方面。众多工业生产过程，如化工、制药、食品加工等，会产生大量含氮废水，若未经有效处理直接排放，会对周边水体造成严重污染。农业领域中，化肥的过度使用以及畜禽养殖废水的随意排放，使得大量氮素流入水体，成为水体氮污染的重要来源。随着人口的增长和生活水平的提高，生活污水的排放量不断增加，其中的氮污染物也不容忽视。

为有效解决水体氮污染问题，生物脱氮技术凭借其高效、经济、环保等显著优势，在污水处理领域得到了广泛应用。生物脱氮主要依靠微生物的代谢活动，通过氨化、硝化和反硝化等一系列复杂的生化反应，将污水中的有机氮和氨氮逐步转化为氮气，最终排入大气，从而实现氮的去除。在氨化过程中，含氮有机物在氨化细菌的作用下分解生成氨氮；硝化反应则由自养型硝化细菌完成，包括氨氧化细菌将氨氮氧化为亚硝酸盐，以及亚硝酸盐氧化细菌进一步将亚硝酸盐氧化为硝酸盐这两个步骤；而反硝化反应由异养型反硝化细菌在缺氧条件下进行，将亚硝酸盐和硝酸盐还原为氮气或氧化亚氮。然而，传统的生物脱氮工艺存在一定的局限性，尤其是在低温环境下，其脱氮效能会受到显著影响。

多数微生物的最适生长温度通常处于20-35℃的范围。当温度降低时，微生物细胞内的酶活性会受到明显抑制。有研究表明，在一定温度范围内，温度每降低10℃，微生物活性大约会降低1倍。这使得微生物的生长和代谢速率大幅减缓，污泥产率下降，对污染物的去除效率和速率也随之降低。以硝化细菌为例，其生物硝化反应虽能在4-45℃范围内进行，但氨氧化细菌（AOB）和亚硝酸氧化细菌（NOB）的最佳生长温度均为25-30℃。当温度低于15℃时，硝化速率明显下降，活性大幅降低；当温度低于5℃时，硝化细菌的生命活动几乎停止。反硝化细菌的最佳生长温度同样在25-30℃，而我国冬季气温常常低于20℃，低温成为冬季微生物反硝化脱氮的关键限制因素。U.Welander等学者考察低温条件下（3-20℃）反硝化工艺的运行性能时发现，在3℃下反应器的反硝化速率仅为15℃下的55%。在我国北方高纬度地区，冬季污水进水温度一般低于硝化及反硝化功能菌群的适宜生长温度，导致冬季生物处理出水氮素超标情况频发。

为了克服低温对生物脱氮的限制，目前常用的方法包括加热污水、提高泥龄/MLSS、生物固定化（填料）、驯化微生物等，但这些方法都存在一定的局限性。加热污水需要消耗大量能源，导致污水处理成本大幅增加；提高泥龄和MLSS的效果有限，且可能引发其他问题，如污泥膨胀等；生物固定化虽能提高微生物抗逆性，但会降低微生物活性，增大传质阻力，成本也有待评估；微生物驯化过程耗时较长，且效果不稳定，难以满足实际工程的需求。因此，筛选和研究耐低温反硝化菌，对于解决低温环境下的污水脱氮问题具有重要的现实意义。耐低温反硝化菌能够在低温环境下保持相对较高的代谢活性，有效地将硝态氮还原为氮气，从而实现污水的脱氮处理，为污水处理提供更加高效、经济、环保的解决方案，助力改善水环境质量，推动可持续发展。

1.2国内外研究现状

在污水处理领域，耐低温反硝化菌的研究一直是热点话题。国外在这方面的研究起步较早，已从多种低温环境中成功分离出多种耐低温反硝化细菌。比如，科研人员从北极海洋沉积物中分离出具有低温反硝化能力的菌株，研究发现该菌株在低温下能保持一定的反硝化活性，对硝态氮有较好的去除效果。在对耐低温反硝化细菌特性的研究中，国外学者深入探究了其生长规律、代谢途径以及对环境因素的响应机制。研究表明，温度、碳源、pH值等环境因素对耐低温反硝化细菌的反硝化性能有着显著影响。在一定低温范围内，随着温度降低，反硝化速率逐渐下降，但不同菌株的下降幅度存在差异；合适的碳源能够为反硝化细菌提供能量和电子供体，促进反硝化过程的进行，如甲醇、乙酸钠等常被用作低温反硝化的有效碳源。

国内对耐低温反硝化细菌的研究也取得了不少成果。科研人员从寒冷地区的土壤、水体等环境中筛选出多株具有高效反硝化能力的低温菌株。通过对这些菌株的鉴定和特性分析，发现它们在低温下不仅能