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小鼠结肠上皮细胞分离方法

实验材料。

1.实验动物：健康的小鼠。

2.试剂：无菌的PBS缓冲液、含10%胎牛血清的DMEM培养基、0.25%胰蛋白酶EDTA溶液、像青霉素和链霉素这类抗生素、D二硫苏糖醇（DTT）、乙二胺四乙酸（EDTA）、胶原酶Ⅳ等。

3.器械：手术用的剪刀、镊子等，无菌的培养皿、离心管、移液器、不同孔径（70μm、40μm等）的细胞筛、培养瓶等。

操作步骤。

1.小鼠处死与结肠取材。

把小鼠用颈椎脱臼法或者其他合适的安乐死办法处死，将小鼠放在超净工作台里面，用75%酒精给腹部皮肤消毒。

用无菌的剪刀和镊子把腹腔打开，小心地把结肠组织分离出来，尽量别损伤周围的组