油菜隐性核不育基因特异标记开发与高油酸低亚麻酸核不育系选育：分子标记辅助选择策略.docxVIP

油菜隐性核不育基因特异标记开发与高油酸低亚麻酸核不育系选育：分子标记辅助选择策略

一、引言

1.1研究背景

油菜（BrassicanapusL.）作为世界范围内广泛种植的重要油料作物，在农业领域占据着举足轻重的地位。其不仅是食用油的主要来源之一，还在工业用油、饲料生产以及生物能源开发等方面发挥着关键作用。油菜籽经过加工所得到的菜籽油，富含多种不饱和脂肪酸，如油酸、亚油酸等，对人体健康具有诸多益处，在食用油市场中占据着相当的份额。同时，油菜在生长过程中能够积累大量的有机物质，其茎、叶等部分还可以作为饲料用于喂养家畜，为畜牧业提供了一定的饲料资源；榨油后的饼粕含有丰富的蛋白质，是优质的饲料原料，广泛应用于水产养殖、畜禽养殖等行业；在生物柴油生产方面，油菜籽也展现出了巨大的潜力，随着全球对清洁能源需求的不断增加，以油菜籽为原料生产的生物柴油，作为一种可再生的清洁能源，其市场前景愈发广阔。

杂种优势利用是提高油菜产量、品质和抗性的有效途径，在油菜育种中具有至关重要的意义。通过杂种优势利用，可以将不同亲本的优良性状结合在一起，从而培育出具有更强生长势、更高产量、更好品质以及更强抗逆性的油菜新品种。目前，油菜杂种优势利用主要通过细胞质雄性不育、细胞核雄性不育、自交不亲和等途径来实现。其中，细胞核雄性不育，尤其是隐性核不育，由于其不育性稳定、恢复系广泛以及不存在不育胞质负效应等优点，成为了油菜杂种优势利用的重要研究方向。

油菜隐性核不育系的研究与应用，对于推动油菜杂种优势利用、提高油菜生产效益具有重要价值。然而，目前油菜隐性核不育系在实际应用中仍面临一些问题，如制种过程中需要人工拔除可育株，这不仅耗费大量的人力、物力和时间，还容易出现可育株拔除不及时或不彻底的情况，从而影响杂交种子的纯度和质量。此外，传统的育种方法在选育具有特定优良性状（如高油酸、低亚麻酸）的油菜品种时，存在周期长、效率低等缺点。因此，开发油菜隐性核不育基因的特异标记，并利用分子标记辅助选择技术选育高油酸低亚麻酸的核不育系，对于解决上述问题、提高油菜育种效率和质量具有重要的现实意义。

1.2油菜隐性核不育研究进展

1.2.1隐性核不育系统特点

油菜隐性核不育系统在杂种优势利用中展现出独特的优势。其不育性稳定，不受环境因素的显著影响，这使得在不同的生态环境下都能保持稳定的不育表现，为杂交制种提供了可靠的保障。恢复源广泛，几乎所有的油菜品种都有可能作为其恢复系，极大地拓宽了杂交组合的选配范围，有利于筛选出具有优良性状组合的杂交种。同时，该系统不存在不育胞质负效应，避免了因细胞质因素对油菜生长发育和产量品质产生的不良影响。

然而，在广泛应用的两系核不育系统制种过程中，也面临着一些难题。由于该不育材料在任何世代均有50%的可育株存在，这些可育株与不育株授粉结实后，下一代会出现50%的不育株和50%的可育株。为了保证杂交种子的纯度，在制种时需要在母本初花前将母本中的可育株及时彻底拔除，这一过程俗称“去杂”。“去杂”工作不仅需要大量的人力投入，而且要求操作人员具备一定的专业知识和经验，以准确识别可育株和不育株。此外，在制种区内，还必须在油菜亲本开花之前将广大农户的所有十字花科作物彻底铲除，即“铲青”，以防止其他十字花科作物的花粉对杂交种子质量产生影响。“去杂”和“铲青”工作费时费力，需要投入大量的资金，并且在实际操作中，由于农村劳动力的减少、劳动力素质的差异以及自然环境等因素的影响，这些工作的执行难度较大，容易出现可育株拔除不及时或不彻底、铲青不全面等问题，从而导致杂种纯度降低，影响油菜杂交种的质量和产量。

1.2.2隐性核不育基因定位与克隆

随着分子生物学技术的不断发展，众多学者在油菜隐性核不育基因的定位与克隆方面取得了一系列重要成果。易斌等以S45AB作为基础材料，对处于杂合状态的隐性核不育基因进行了深入研究。通过3年的育性调查，证实了在两型系S45AB中控制育性的两个位点中只有一个处于分离状态，将这个位点的不育基因命名为Bnms1，另一个位点处于隐性纯合状态，不育基因命名为Bnms2。应用AFLP与BSA结合的方法，筛选了2560对AFLP引物组合，获得7个与目的基因（Bnms1）连锁的AFLP标记AF1-AF7，最终将Bnms1基因定位在标记SC1和SC7之间，标记与Bnms1基因间的遗传距离分别为0.1cM和0.3cM，为该基因的克隆和功能研究奠定了坚实基础。

除了Bnms1基因外，还有其他一些隐性核不育相关基因被陆续定位和克隆。这些研究成果不仅揭示了油菜隐性核不育的遗传机制，为深入理解油菜雄性不育的分子机理提供了理论依据，而且为油菜隐性核不育系的选育和利用提供了