Takara Bio Inc.QuickCut™ 限制酶 EcoR I 10X QuickCut Buffer 10X QuickCut Green Buffer 说明书.pdf

QuickCut™EcoRIGAATTC

CTTAAG

CodeNo.：1611

包装量：500μl（500次）

附带试剂：

10XQuickCutBuffer1.5ml×2

10XQuickCutGreenBuffer1.5ml×2

制品说明：质量控制：

QuickCut限制酶是一类快速切断基质DNA的限制酶。所有1）功能检测：

QuickCut限制酶在10XQuickCutBuffer和10XQuickCutGreen在1μg线性DNA中加入1μlQuickCut限制酶，在50μl

Buffer两种通用缓冲液中的活性可达100%，可在5-30分钟内切断反应体系中，37℃保温5min，能完全消化线性DNA。

基质DNA，如质粒DNA、PCR产物等。这样可以在同一个反应体2）StarActivityTest：

系内任意组合多种限制酶同时切断基质DNA，操作简便，节省时间，在1μgDNA中加入1μlQuickCut限制酶，进行1hr酶

避免了分步酶切的繁琐操作。切反应，然后进行琼脂糖电泳，DNA片段的电泳谱带不发生

每种QuickCut限制酶产品均附带两种通用缓冲液：10XQuickCut变化。

Buffer和10XQuickCutGreenBuffer。10XQuickCutGreen3）ExonucleaseContaminationTest：

Buffer中含有电泳时所必需的色素等试剂，酶切产物可直接进行电在含有特定DNA片段的反应体系里加入1μlQuickCut限

泳检测，使用更加方便。其中蓝色染料在1%琼脂糖凝胶中与3-5kb制酶，37℃保温30min，失活处理后加入T4DNA连接酶，

DNA片段的迁移速度相当；黄色染料在1%琼脂糖凝胶中与10bp特定DNA片段可被连接，无核酸外切酶活性被检出。

DNA片段的迁移速度相当。

甲基化的影响：

酶贮存液：根据识别序列后续碱基的不同，有时受CGmethylase影响。

10mMTris-HCl,pH7.5

100mMKClStar活性：

2+

0.1mMEDTA高甘油浓度、Mn存在、低离子强度条件下，识别序列会发生变化。

1mMDTT如果在反应液中添加Spermine（0.2mM左右），活性降低20～

0.01%BSA30%，但可以抑制30～50%的Star活性。