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2021pcr考试题及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的原理是？

A.基因重组

B.核酸杂交

C.DNA复制

D.蛋白质合成

2.PCR反应体系不包括？

A.Taq酶

B.dNTP

C.引物

D.抗体

3.引物设计的原则不包括？

A.长度适宜

B.具有特异性

C.富含GC

D.避免自身互补

4.PCR反应的变性温度一般是？

A.55℃

B.60℃

C.95℃

D.72℃

5.PCR技术可用于？

A.基因克隆

B.蛋白质测序

C.细胞培养

D.组织切片

6.延伸温度通常为？

A.55℃

B.60℃

C.72℃

D.85℃

7.以下哪种物质不是PCR反应必需的？

A.模板DNA

B.缓冲液

C.葡萄糖

D.镁离子

8.PCR技术的发明人是？

A.穆利斯

B.沃森

C.克里克

D.孟德尔

9.退火温度与引物的什么有关？

A.长度

B.浓度

C.纯度

D.颜色

10.PCR反应中循环次数一般为？

A.10-20次

B.20-30次

C.30-40次

D.40-50次

答案：1.C2.D3.C4.C5.A6.C7.C8.A9.A10.B

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的特点包括？

A.特异性强

B.灵敏度高

C.操作简便

D.快速高效

2.PCR反应的条件有？

A.温度

B.时间

C.酶量

D.模板量

3.引物的作用是？

A.引导DNA合成

B.提高反应特异性

C.增加反应速度

D.降低背景

4.影响PCR反应的因素有？

A.模板质量

B.引物设计

C.Taq酶活性

D.反应体系污染

5.PCR技术可应用于？

A.遗传病诊断

B.病原体检测

C.肿瘤研究

D.法医鉴定

6.一个完整的PCR反应过程包括？

A.变性

B.退火

C.延伸

D.冷却

7.Taq酶具有的特性是？

A.耐高温性

B.5-3聚合酶活性

C.3-5外切酶活性

D.5-3外切酶活性

8.PCR反应体系中dNTP的作用是？

A.提供原料

B.维持反应体系pH

C.参与能量代谢

D.增强酶活性

9.引物设计时需要考虑的因素有？

A.长度

B.碱基组成

C.引物间互补性

D.引物与模板的互补性

10.PCR技术的发展历程涉及？

A.技术改进

B.新酶的发现

C.仪器更新

D.应用拓展

答案：1.ABCD2.ABCD3.AB4.ABCD5.ABCD6.ABC7.AB8.A9.ABCD10.ABCD

判断题（每题2分，共10题）

1.PCR技术只能扩增DNA。（）

2.引物浓度越高越好。（）

3.Taq酶无校对功能。（）

4.PCR反应不需要模板。（）

5.退火温度过低会导致非特异性扩增增加。（）

6.延伸时间越长产物量越多。（）

7.PCR技术可用于扩增RNA。（）

8.反应体系污染会影响PCR结果。（）

9.引物的GC含量对退火温度无影响。（）

10.PCR循环次数越多越好。（）

答案：1.√2.×3.√4.×5.√6.×7.×8.√9.×10.×

简答题（总4题，每题5分）

1.简述PCR技术的基本原理。

以DNA复制为原理，通过高温变性使模板DNA双链解开，低温退火使引物与模板结合，适温延伸在Taq酶作用下合成新的DNA链，经多次循环扩增出大量目的DNA。

2.引物设计的要点有哪些？

长度适宜，一般15-30bp；具有特异性，与模板特异结合；避免自身互补及引物间互补；碱基组成合理，GC含量适中。

3.影响PCR反应的主要因素有哪些？

模板质量、引物设计、Taq酶活性、dNTP浓度、反应体系污染、温度、时间、镁离子浓度等。

4.PCR技术有哪些应用？

遗传病诊断、病原体检测、肿瘤研究、法医鉴定、基因克隆、基因表达分析等。

讨论题（总4题，每题5分）

1.如何提高PCR反应的特异性？

合理设计引物，确保其特异性；优化反应条件，如合适的退火温度等；避免反应体系污染；提高模板质量。

2.PCR技术在临床诊断中的优势与不足。

优势：快速、灵敏、特异性强，可检测微量病原体等。不足：易污染导致假阳性；对操作要求高；可能因引物非特异性等出现假阴性。

3.怎样优化PCR反应体系？

根据模板等调整引物浓度；优化Taq酶用量