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牛冷冻精液的制作

种公牛站作为畜牧业良种繁育体系的重要组成部分，是我国法定的冻精生产和经营单位。某奶牛育种中心，现有来自美国、加拿大、澳大利亚等国家的优秀荷斯坦公牛188头，每年可生产冻精200多万剂，销售遍布全国28个省、市、自治区。冷冻精液的生产流程？牛冷冻精液的制作

牛冷冻精液国家标准（GB/T4143-2008）产品技术要求GBT4143-2008欧盟国标牛冷冻精液有效精子数（万个）≥800（水牛≥1000）≥600活率≥0.35（水牛≥0.3）≥0.4畸形率（%）≤18（水牛≤20）≤20顶体完整率（%）≥40—细菌菌落数（个）≤800≤500病原微生物无无情期受胎率（%）—50

按国家标准选择种公牛，经农业部鉴定并列入国家正式名录的公牛；采精操作要规范，采精频率要合理；精液品质要优良精子活率≥0.7精子密度≥8亿／mL精子畸形率≤15％。一、采精及品质检查

二、稀释精液某公牛站，2013168号公牛于5月12日采集精液10mL，经检查活率为0.7，密度为13.8亿／mL。按国标要求制作细管冻精，试确定稀释倍数。稀释前精子密度：13.8亿／mL细管冻精每毫升含有的有效精子数：0.08亿÷0.25mL=0.32亿／mL细管冻精精子密度：0.32亿／mL÷0.35=0.914亿／mL稀释倍数：13.8亿／mL÷0.914亿／mL≈15（倍）GBT4143-2008规定细管冻精剂量0.25mL有效精子数≥800万精子活率≥0.35。如何确定稀释倍数？

二、稀释精液配方：100mL12%的蔗糖75mL卵黄20mL甘油5mL青霉素10万IU链霉素10万IU冷冻精液的稀释液配方需加入哪些成分？如何配制稀释液？配制：12%蔗糖溶液：12g蔗糖溶于50mL蒸馏水，再加水至100mL，过滤、消毒；取75mL冷却蔗糖溶液，分别加入20mL卵黄、5mL甘油、10万IU青霉素、10万IU链霉素，混合均匀，置于冰箱备用。

Ⅰ精液稀释液Ⅰ（无甘油）30℃0℃～5℃Ⅱ混合液稀释液Ⅱ（有甘油）二、稀释精液缓慢降温两次稀释法：缩短甘油与精子的接触时间甘油添加量：5%～7%

三、分装精液

四、冷冻精液平衡：冷冻前，将精液置于0℃～5℃平衡2～4h，让甘油充分渗入精子内部。

五、活率检测有效精子数是评价冻精质量的一项重要指标。38℃解冻细管冻精，经检测精子活率不低于0.35。

六、保存精液经抽样检测合格的冻精，按品种、编号、采精日期、型号标记、包装，转入液氮罐贮存备用。

加速牛群改良推广人工授精技术提高种公牛利用率牛冷冻精液的制作严格按照国标规范制作全面提高冷冻精液质量