2025年课题计划项目以及可行性研究报告 .pdfVIP

博学之，审问之，慎思之，明辨之，笃行之。——《礼记》

河南省重点研发划计项目申报书

课题题为：目琼脂糖自组装膜基底型免疫芯片载体制备及抗体固定研究

项目内容摘要：

研究意义：为了提升免疫芯片对抗体的固定效率，建立多糖纳米膜基底型芯片载体制备的新

方法，为后续免疫芯片的制备提供实验参考和理论支持。

研究内容：本文选择多糖中水溶性的琼脂糖为基质，利用分子自组装技术，以玻片为载体，

让琼脂糖、高碘酸钠对玻片表面进行修饰，制备琼脂糖自装组膜载体。利用SEM、AFM和

FTIR进对载行体表征，获得最佳制备条件；利用荧光微显成像及ImageJ件软，研究该载

体对2种不同种属来源抗体的固定效率，对琼脂糖自装组膜载体和普通醛基修饰对载抗体

体的固定效果进行对比分析。

关键字琼脂糖;免疫芯片;抗体固定

项目概况

1、主要研究开发内容

选择多糖中水溶性的琼脂糖为基质，利用分子自组装技术，以玻片为载体，

让琼脂糖、高碘酸钠对玻片表面进行修饰，制备琼脂糖自装组膜载体。利用SEM、

AFM和FTIR进对载行体表征，获得最佳制备条件；利用荧光微显成像及ImageJ

软件，研究对载体2该种不同种属来源抗体的固定效率，对琼脂糖自装组膜载体

和普通醛基修饰对载抗体体的固定效果进行对比分析。

材料：琼脂糖、3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTES)(Sigma公司，美国)，

高碘酸钠、戊二醛、36%冰乙酸、无水乙醇等均为分析纯(国药集化团学试剂有

限公司);FITC记驴抗标的兔抗体(上海生工)，FITC记标的兔抗人AFP抗体(上

海生工)。

器械：超纯水机、子电天平、磁力搅拌器、烘干箱，JSM-6360LV型高低真

空扫描镜，电FTS3000FX型的傅立叶变换外红光谱仪，OLYMPUSBX5型1倒置荧

光显微镜，NanoscopeIIIa型原子力显微镜。

基片的预处理：25mm×75mm光学载玻片用氨水洗液(体积比氨为水∶氧过

化氢∶水=1∶1∶5)置摇床上振摇2h，取出后用超纯水清洗干净，放入1mol

/LHCl中浸泡过夜，再用超纯水超声10min，无水乙醇超声清洗2次，每次5min，

置电热恒温箱(120℃)烘烤2h。

实验组琼脂糖自组装膜载体制备，对照进组行普通基醛载体制备。

基片表面抗体探针的固定，测定观察载体表面荧光探针的固定效率。

2、主要技术和指标经济（限1000字）

主要技术：

琼脂糖自装组膜载体制备①分配别制0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%

的琼脂糖溶液，微波炉煮沸3min完全溶解;②将2ml琼脂糖溶液覆盖在

60℃预热的清洁玻片上;琼脂糖室温凝固后，置37℃烤箱烘干2h;置室温保

存用备;③将上述制备好的琼脂糖玻片置于50mmol/LNaIO4溶液中室温下活

化60min。接着用0.1mol/LpH7.4PBS洗涤5min×3次，氮气流吹干。

其身正，不令而行；其身不正，虽令