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Mutantp53与Bche基因协同影响Wilms瘤发展转移的机制解析

一、引言

1.1研究背景与意义

Wilms瘤，又称肾母细胞瘤，是儿童期最常见的肾脏恶性肿瘤，在儿童实体肿瘤中占据重要比例。该肿瘤好发于5岁以下儿童，发病高峰年龄在2-3岁，对患儿的健康和生命构成严重威胁。临床上，Wilms瘤通常表现为腹部肿块，部分患儿可能伴有腹痛、血尿、高血压等症状。随着肿瘤的进展，晚期可出现转移，最常见的转移部位是肺部，这大大增加了治疗的难度和复杂性。

目前，对于Wilms瘤的治疗主要采取手术、化疗和放疗相结合的综合治疗方案。在过去几十年中，随着治疗技术的不断进步，Wilms瘤患者的总体生存率得到了显著提高。然而，对于一些高危患者，如存在肿瘤转移、复发或具有不良病理特征的患儿，预后仍然较差，5年生存率相对较低。此外，现有的治疗方法往往会给患儿带来一系列的副作用和并发症，影响其生活质量和长期生长发育。

深入研究Wilms瘤的发病机制，寻找新的治疗靶点和生物标志物，对于提高Wilms瘤的治疗效果、改善患者预后具有重要的临床意义。在众多与肿瘤发生发展相关的基因中，Mutantp53和Bche基因逐渐引起了研究者的关注。p53基因作为一种重要的肿瘤抑制基因，在细胞周期调控、DNA损伤修复、细胞凋亡等过程中发挥着关键作用。当p53基因发生突变（即Mutantp53）时，其正常功能丧失，反而可能获得促癌功能，促进肿瘤的发生发展。Bche基因作为Mutantp53的下游基因，可能在Mutantp53介导的肿瘤生物学行为中发挥重要作用，但目前其具体机制尚不清楚。

本研究旨在探讨Mutantp53及其下游基因Bche对Wilms瘤发展转移的作用，通过揭示其潜在的分子机制，为Wilms瘤的治疗提供新的理论依据和潜在的治疗靶点，有望改善Wilms瘤患者的预后，具有重要的科学价值和临床应用前景。

1.2国内外研究现状

在国外，对Wilms瘤的研究开展较早且较为深入。在遗传学方面，自“双击”假说提出后，通过基因连锁图谱、表观遗传研究、全外显子组测序等技术，已经揭示了大量与Wilms瘤相关的突变驱动因素以及复杂的遗传背景。例如，WT1基因的发现是对肾母细胞瘤基因学研究的重大贡献，其在肾脏发育和肿瘤发生中起着关键作用。此外，TP53、CTNNB、AMER1、MYCN等基因的突变对Wilms瘤的影响也有详细论述。在肿瘤与肾脏发育异常的关系研究中，通过基因组、基因表达、甲基化和小鼠模型的研究，深入探讨了肾脏发育的关键环节以及在Wilms瘤形成中如何被扰乱。在预后生物标志物研究方面，已经明确染色体1q的拷贝数增加、染色体1p和16q的杂合性丢失（LOH）、miRNA表达异常、TP53基因的突变、MYCN基因拷贝数增加等与Wilms瘤患者的预后密切相关。

在国内，对Wilms瘤的研究也在不断推进。学者们在基因遗传学基础研究方面，对p53、CTNNB1、WTX以及WT1等基因进行了研究，发现p53的表达与肿瘤进展、复发、转移及肿瘤的退行性病变有关，75％的未分化WT可检测到p53基因突变。在临床治疗方面，通过对大量病例的分析，总结出适合我国儿童Wilms瘤患者的综合治疗方案，提高了患者的生存率。然而，目前国内外对于Mutantp53及其下游基因Bche在Wilms瘤发展转移中的作用及机制研究还相对较少，尤其是针对二者之间相互作用以及对肿瘤细胞生物学行为影响的研究尚存在空白。现有研究主要集中在单一基因对Wilms瘤的影响，缺乏对基因网络和信号通路的系统性研究。因此，深入开展这方面的研究具有重要的科学意义和临床价值，有望为Wilms瘤的精准治疗提供新的思路和方法。

1.3研究目的与内容

本研究的目的是深入揭示Mutantp53及其下游基因Bche对Wilms瘤发展转移的作用及分子机制，为Wilms瘤的治疗提供新的理论依据和潜在治疗靶点。

具体研究内容如下：

Mutantp53对Wilms瘤细胞生物学行为的影响：通过细胞实验，研究Mutantp53对Wilms瘤细胞增殖、迁移、侵袭、成瘤等能力的影响。利用细胞转染技术，构建稳定表达Mutantp53的Wilms瘤细胞系，采用MTT实验、克隆形成实验检测细胞增殖能力；细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；裸鼠成瘤实验观察细胞成瘤能力。

筛选Mutantp53的下游基因Bche：运用RNA-SEQ技术，对敲低Mutant