银杏外种皮提取物对获得性S180MDR细胞株的逆转效应及机制探究.docxVIP

银杏外种皮提取物对获得性S180MDR细胞株的逆转效应及机制探究

一、引言

1.1研究背景与意义

肿瘤严重威胁人类健康，化疗是重要治疗手段，但多药耐药（MDR）极大阻碍了化疗效果。肿瘤多药耐药是指肿瘤细胞接触一种化疗药物产生耐药后，对其他结构和作用机制不同的化疗药物也产生交叉耐药的现象，这使得原本有效的化疗药物失效，导致疾病复发和患者生存率下降。比如在肺癌、乳腺癌、卵巢癌等多种癌症治疗中，多药耐药问题普遍存在，成为癌症治愈的主要障碍。

肿瘤多药耐药产生的机制复杂多样。其中，P-糖蛋白（P-gp）介导的耐药是最常见且重要的机制之一。P-gp是一种ATP依赖性的药物外排泵，由mdr1基因编码，能够将多种化疗药物从细胞内泵出，降低细胞内药物浓度，使化疗药物无法发挥细胞毒作用，其底物多为天然性抗癌药，如长春碱类、蒽环类、紫杉醇类和鬼臼毒素类等。谷胱甘肽S转移酶（GST）介导的MDR也较为关键，GST能够催化谷胱甘肽与化疗药物结合，形成无活性的谷胱甘肽-药物复合物，降低细胞内药物浓度。此外，拓扑异构酶II（TopoII）表达减少或活性降低、凋亡相关基因如bcl-bax等表达异常导致肿瘤细胞对化疗药物的凋亡诱导作用抵抗、DNA修复能力增强以及药物靶点的改变等，都能引发多药耐药。

目前，西药中已开发的多药耐药逆转剂如钙通道阻滞剂（异博定及其衍生物）、钙调蛋白拮抗剂（吩噻嗪类化合物）、免疫调节剂（环孢菌素A及其衍生物）等，大多具有一定毒副作用。第一代逆转剂代表药物异博定在体外有效逆转多药耐药所需浓度高，作用于人体会出现很强的心血管毒性；环孢菌素A的免疫抑制作用也极大地限制了其临床应用。第二代逆转剂如VX710、PSC833和XR9051虽逆转作用强，但常见毒性如共济失调和高胆红素血症，且会明显改变抗癌药物的血药动力学，影响化疗药物的抗肿瘤疗效。因此，寻找安全、有效的多药耐药逆转剂迫在眉睫。

银杏外种皮提取物（GBEE）作为一种从银杏外种皮中提取的活性组合物，具有成为新型多药耐药逆转剂的潜力。银杏是我国特有的名贵树种，其叶、果和外种皮等皆具有药用开发价值。前期研究表明，GBEE具有显著抗肿瘤作用，并可促进荷瘤小鼠及CTX损伤小鼠的免疫功能，多糖类物质是GBEE发挥抗肿瘤及免疫促进作用的主要有效成分。对GBEE进行深入研究，探索其对肿瘤多药耐药的逆转作用，不仅能为肿瘤治疗提供新的药物选择，还可能推动中药在肿瘤治疗领域的应用，具有重要的理论和实际意义。

1.2研究目的

本研究旨在深入探究GBEE对获得性S180MDR细胞株的逆转作用及其潜在机制。具体而言，通过一系列体内外实验，明确GBEE是否能够有效逆转S180MDR细胞株的耐药性，观察其对细胞内化疗药物积累量、细胞膜P-gp功能活性等的影响；同时，检测相关耐药基因MDR-1mRNA、MRP-1mRNA的表达变化，以及血清中细胞因子IL-3、IL-18及IFN-γ的水平变化，从分子和细胞层面揭示GBEE逆转多药耐药的作用机制，为肿瘤的临床治疗提供新的思路和理论依据。

二、文献综述

2.1肿瘤多药耐药概述

肿瘤多药耐药（MDR），是肿瘤治疗领域面临的重大挑战，指肿瘤细胞在接触一种化疗药物产生耐药后，对其他结构和作用机制不同的化疗药物也呈现交叉耐药的现象。这种现象在多种肿瘤类型中普遍存在，极大地限制了化疗的效果，成为导致肿瘤治疗失败的关键因素之一。

从表现形式来看，MDR使得原本对肿瘤细胞有效的化疗药物，疗效大幅下降甚至完全失效。在乳腺癌治疗中，当肿瘤细胞产生多药耐药后，常用的化疗药物如蒽环类（阿霉素）、紫杉烷类（紫杉醇）等，无法有效抑制肿瘤细胞的生长和扩散，肿瘤会继续进展，导致患者病情恶化。从危害角度而言，MDR不仅增加了肿瘤复发的风险，还降低了患者的生存率和生活质量。对于肺癌患者，一旦出现多药耐药，后续治疗选择极为有限，患者可能需要承受更强烈的治疗副作用，而治疗效果却不尽人意。

肿瘤多药耐药的产生机制复杂，涉及多个方面。P-糖蛋白（P-gp）介导的耐药机制备受关注。P-gp由mdr1基因编码，是一种ATP依赖性的药物外排泵。它能够利用ATP水解产生的能量，将进入细胞内的化疗药物主动泵出细胞，降低细胞内药物浓度，使其无法达到有效杀伤肿瘤细胞的水平。许多天然性抗癌药，如长春碱类、蒽环类、紫杉醇类和鬼臼毒素类等，都是P-gp的底物，当P-gp过度表达时，这些药物就难以在细胞内发挥作用。

谷胱甘肽S转移酶（GST）介导的MDR也不容忽视。GST能够催化谷胱甘肽与化疗药物结合，形成无活