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小肠平滑肌的生理特性和药物的影响

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实验目的

学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。

观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。

观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。

实验材料

实验动物：豚鼠

器材：小肠平滑肌恒温水浴装置，球胆（气泵或氧气筒），张力换能器，烧杯，温度计，注射器，注射针头，棉线，手术剪，培养皿，滴管。

药品：台式液，10-5mol/L乙酰胆碱，10-4mol/L苯海拉明，10-5mol/L磷酸组胺，10-3mol/L硫酸阿托品，1%BaCl2溶液。

实验方法和步骤

豚鼠离体肠平滑肌的制备

以手倒提豚鼠，用木槌猛击其头后部令其急死，立即剖开腹腔，轻轻剪取回肠，迅速置于冷台式液中，除去肠系膜，并将肠管剪成数段，用台式液将肠内容物冲洗干净，然后剪成小段备用。注意操作应轻柔。

实验装置的准备

此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。浴槽内水温由恒温装置控制在37±0.5℃。浴管与浴槽相连，以使浴管内营养液保持同样的恒温。气源（充气气囊或气泵等）与浴管相连，气流量以1～2个小气泡为宜。浴管下端与排液管相连，其上端管口处可随时充入新的恒温营养液。

标本连接及记录

轻取一段标本，一端用线系在装置的小钩上，对角线方向将另一端用与张力换能器相连的小钩钩住，慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜，此时标本通过张力换能器与计算机相连。标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液，适应10~15min后，描记一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。

如果环境适宜，标本存活，适应10～15min后，描记一段正常曲线，然后按如下步骤给药。

加入药物观察并记录曲线

加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml，待收缩到最高点时，加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml，然后再加入同量的乙酰胆碱，观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。

加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml，待收缩到最高点时，加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml，3min后再加入同量的磷酸组胺溶液，观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。

加入1%BaCl2溶液1ml，作用达到最高点时，加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml，再加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml，观察结果。

实验结果

0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱

0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液

阿托品的药理机制

阿托品可竞争性拮抗M3受体，对对小肠平滑肌有松弛作用，尤其对活动过度或痉挛的平滑肌作用更为显著。可抑制胃肠道平滑肌痉挛，降低蠕动的幅度和频率。【2】

组胺的药理机制

组胺激活H1受体，通过IP3、DAG等信使分子介导，产生支气管与胃肠道平滑肌兴奋效应。对多种动物胃肠道平滑肌都有兴奋作用，豚鼠回肠最为敏感。【2】

苯海拉明的药理机制

与组胺竞争结合H1受体，对抗组胺引起的胃肠道平滑肌的收缩作用。【2】

BaCl2的药理机制

Ba2+是Ca2+拮抗剂，经小肠平滑肌Ca2+通道直接进入胞浆，引起相对剧烈的肠管痉挛。

药物曲线分析

0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱

初次加入Ach后，小肠平滑肌收缩力明显上升，并趋于稳定；加入阿托品后，Ach作用被阻断，小肠平滑肌收缩力下降；再次加入等量Ach后小肠平滑肌张力恢复稳定。

0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液

初次加入组胺后，小肠平滑肌收缩力明显上升，并趋于稳定；加入苯海拉明后，组胺作用被阻断，小肠平滑肌收缩力下降；再次加入等量组胺后小肠平滑肌张力恢复稳定。

1mlBaCl2溶液-0.1ml硫酸阿托品-0.3ml苯海拉明

加入BaCl2后小肠平滑肌张力不规则上升，不久便陷入的痉挛状态；加入阿托品后，并无张力下降趋势，说明BaCl2作用与M3受体作用无关；加入苯海拉明，肌张力略微下降，理论上BaCl2作用与H1受体亦无关，推测可能与上一组实验中浴管内有少量残留组胺有关。

实验反思

本次实验中，前期使用第一段小肠进行实验未见到平稳的有节律的收缩图线，起初由于棉线牵拉过紧，使得平滑肌超出适宜的初长度难以收缩。但当调整松紧程度后仍未见规律的波动起伏。

在使用取回的第二段小肠后，尤其注意在系线过程中，不用金属镊子操作，不在空气中过久暴露小肠，所有的步骤应轻柔完成避免对小肠造成不可逆性损伤，小肠要在水温为37±0.5℃且有通气的条件下才能正常进行收缩舒张运动。

参考目录

朱大年,王庭槐.生理学.第8版[M].人民卫生出版社,2013.PP187~188

杨宝峰.药理学.第8版[M].人民卫生出版社,2013.PP52，66，285~286