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- 2025-10-18 发布于河南
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操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰
河南农业大学考研专业课《现代分子生物
学》
课程试卷(含答案)
__________学年第___学期考试类型:(闭卷)考试
考试时间:90分钟年级专业_____________
学号_____________姓名_____________
1、分析题(5分,每题5分)
1.写出从组织中抽取RNA的关键步骤,并解释如何判断RNA质量。
答案:(1)从组织中提取RNA的步骤如下:
①将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加入1mlTRIzol
裂解液溶解样品,充分吹打混匀。
②每1mlTRIzol加入2.0ml氯仿,剧烈震荡15s,室温放置
5min。
③4℃,10000g离心15min,此时RNA主要开始集中在水相中。
④将水相转移至新的重新分配离心管中,加入等体积异丙醇,室
温放置10min。
⑤4℃,10000g离心10min,此时可在离心管顶端观察到白色
观察沉淀,即为RNA。
⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀,4℃,7500g以下,离心5min,弃
操千曲尔后晓声,观千剑尔后识器。——刘勰
上清。
⑦超净台中吹干,加入无RNase的水溶解。
(2)检测RNA质量的方法如下:
①凝胶成像:取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后,跑琼脂糖凝胶
电泳,如果28S和18S条带明亮、清晰,并且28S的亮度在18S条
带的两倍以上,则认为RNA的质量是好的。
②吸光度检测:使用紫外分光光度计筛查RNA样品在260nm、
280nm处的吸光度,若两者的比值在1.8~2.0时,可认为RNA纯
度良好,蛋白质等肝细胞其他生物体的污染可以接受。
解析:
2、判断题(55分,每题5分)
1.限制性内切核酸酶具有极高的专一性,可以识别蛋白质或多肽链
上的特定位点,将其切断,形成黏性末端或平端。()
答案:错误
解析:限制性内切核酸酶具有极高的专一性,可以识别DNA双链的特
定位点,将其切断,形成黏性末端或平端。
2.紫外线引起DNA损伤的结果是导致胸腺嘧啶二聚体的形成。
()[扬州大学2019研]
答案:正确
天行健,君子以自强不息。地势坤,君子以厚德载物。——《周易》
解析:紫外线照射后DNA,发现有几个变化,其中的明显的变化是同
一链上的两个邻接嘧啶核苷酸最共价联结,形成嘧啶二聚体。
3.根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探
针,可从DNA文库筛选到相应的基因。()
答案:错误
解析:筛选DNA文库的探针应该是根据DNA序列制备的,而不是蛋
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