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pcr考试题库及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的原理是？

A.碱基互补配对

B.DNA复制

C.转录

D.翻译

2.PCR反应体系不包括？

A.引物

B.dNTP

C.模板

D.核糖体

3.以下哪种是PCR常用的酶？

A.淀粉酶

B.蛋白酶

C.Taq酶

D.脂肪酶

4.PCR反应的变性温度一般是？

A.55℃

B.65℃

C.72℃

D.95℃

5.PCR循环的步骤不包括？

A.退火

B.延伸

C.解旋

D.变性

6.引物设计的原则不包括？

A.长度适宜

B.特异性强

C.富含AT

D.避免二级结构

7.PCR产物的检测方法不包括？

A.凝胶电泳

B.分光光度法

C.荧光定量

D.比色法

8.实时荧光定量PCR主要检测？

A.DNA数量

B.RNA数量

C.蛋白质数量

D.细胞数量

9.普通PCR与荧光定量PCR的区别在于？

A.有无引物

B.有无模板

C.有无荧光检测

D.有无酶

10.PCR技术最早由谁发明？

A.穆里斯

B.桑格

C.沃森

D.克里克

答案：1.B2.D3.C4.D5.C6.C7.D8.B9.C10.A

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可应用于？

A.基因克隆

B.疾病诊断

C.法医鉴定

D.物种鉴定

2.PCR反应体系的成分有？

A.引物

B.dNTP

C.Taq酶

D.模板

3.提高PCR特异性的方法有？

A.优化引物设计

B.提高退火温度

C.减少模板量

D.增加酶量

4.PCR反应的延伸温度通常是？

A.55℃

B.65℃

C.72℃

D.82℃

5.以下哪些是PCR引物的特点？

A.特异性

B.互补性

C.稳定性

D.随意性

6.PCR产物的分析方法有？

A.凝胶电泳

B.测序

C.杂交

D.质谱分析

7.荧光定量PCR的优点有？

A.灵敏度高

B.特异性强

C.可定量分析

D.操作简便

8.实时荧光定量PCR的荧光标记物有？

A.SYBRGreen

B.TaqMan探针

C.荧光素

D.罗丹明

9.PCR技术的发展历程包括？

A.普通PCR

B.巢式PCR

C.多重PCR

D.实时荧光定量PCR

10.PCR技术在分子生物学中的作用有？

A.扩增特定基因片段

B.检测基因表达

C.构建基因文库

D.基因编辑

答案：1.ABCD2.ABCD3.AB4.C5.ABC6.ABCD7.ABC8.AB9.ABCD10.ABC

判断题（每题几分，共10题）

1.PCR技术只能扩增DNA。（）

2.引物浓度越高，PCR效果越好。（）

3.PCR反应不需要模板。（）

4.Taq酶具有热稳定性。（）

5.PCR循环次数越多越好。（）

6.荧光定量PCR可绝对定量。（）

7.普通PCR能检测基因表达量。（）

8.PCR产物可直接用于测序。（）

9.引物长度越长特异性越强。（）

10.PCR技术可用于病毒检测。（）

答案：1.√2.×3.×4.√5.×6.√7.×8.×9.×10.√

简答题（总4题，每题5分）

1.简述PCR反应的基本步骤。

变性：95℃使模板DNA解链；退火：适宜温度使引物与模板结合；延伸：72℃Taq酶合成新链。

2.引物设计的要点有哪些？

长度适宜，避免二级结构，特异性强，与模板互补，GC含量合适。

3.荧光定量PCR的原理是什么？

利用荧光信号累积实时监测PCR进程，通过标准曲线对样品中核酸进行定量分析。

4.PCR技术在医学领域有哪些应用？

疾病诊断、病原体检测、基因分型、药物研发等。

讨论题（总4题，每题5分）

1.如何优化PCR反应条件以提高扩增效率？

可调整引物浓度、退火温度、酶量等，根据模板和引物特点优化，避免非特异性扩增。

2.荧光定量PCR结果不准确可能有哪些原因？

引物设计不佳、模板质量问题、荧光试剂失效、仪器误差等。

3.PCR技术在农业上有哪些潜在应用？

作物品种改良、病虫害检测、转基因检测等。

4.比较普通PCR与巢式PCR的优缺点。

普通PCR操作简单，巢式PCR特异性更强，但后者操作复杂、成本高。