脱盐羊乳清粉中牛源乳清蛋白的测定.pdfVIP

T/CNHFAXXX—XXXX

ICSXXXXXXX

CCSXXX

中国营养保健食品协会团体标准

T/CNHFAXXX—XXXX

脱盐羊乳清粉中牛源乳清蛋白的测定

DeterminationofBovine-derivedWheyProteininGoat/SheepDemineralizedWheyPowder

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国营养保健食品协会发布

1

T/CNHFAXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起

草规则》的规定起草。

本文件由中国营养保健食品协会归口。

本文件起草单位：索地雅乳业商贸（上海）有限公司、杭州璞湃科技有限公司、圣元

营养食品有限公司。

本文件主要起草人：王娜、胡玲玲、赖世云、任一平、宋飞、纪赟。

2

T/CNHFAXXX—XXXX

脱盐羊乳清粉中牛源乳清蛋白的测定

1范围

本文件规定了脱盐羊乳清粉中牛源乳清蛋白的测定方法。

本文件适用于脱盐羊乳清粉，不适用于水解脱盐羊乳清粉。

2方法原理

试样中的蛋白经溶解后，用碱性胰蛋白酶酶解成肽段，经液相色谱分离，串联质谱测

定牛源的α-乳白蛋白、β-乳球蛋白特异肽段，内标法定量。再根据特异肽段与目标蛋白的

一一对应关系，获得试样中牛源的α-乳白蛋白、β-乳球蛋白的含量；再根据α-乳白蛋白、β-

乳球蛋白与乳清蛋白的关系，计算出脱盐羊乳清粉中牛源乳清蛋白的含量，最终获得试样

中牛源乳清蛋白的占比。

3试剂和材料

注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1碳酸氢铵（NHHCO）。

43

3.1.2二硫苏糖醇（CHOS，DTT）。

41022

3.1.3碘代乙酰胺（ICHCONH，IAA）。

22

3.1.4乙酸（CHCOOH）。

3

3.1.5甲酸（HCOOH）：色谱纯。

3.1.6乙腈（CHCN）：色谱纯。

3

3.1.7碱性胰蛋白酶：活力大于10000BAEE每毫克蛋白质。

3.2试剂配制

3.2.1碳酸氢铵溶液（500mmol/L）：称取3.95g碳酸氢铵，用水溶解后定容至100mL。

3.2.2二硫苏糖醇溶液（500mmol/L）：称取0.771g二硫苏糖醇，用500mmol/L的碳酸氢

铵溶液溶解后定容至10mL。

3.2.3碘代乙酰胺溶液（500mmol/L）：称取0.925g碘代乙酰胺，用500mmol/L的碳酸氢

铵溶液溶解后定容至10mL。

3.2.4乙酸溶液（1%，V/V）：移取0.1mL乙酸，用水稀释并定容至10mL。

3.2.5胰蛋白酶溶液（1mg/mL）：称取10mg碱性胰蛋白酶，用1%乙酸溶液溶解后定容

3

T/CNHFAXXX—XXXX

至10mL。

3.2.6甲酸水溶液（0.1%，V/V）：吸取1mL甲酸，用水稀释并定容至1000mL。

3.2.7