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病理科病理标本切割技术规范

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目录

01

标本接收与准备

02

切割基本原则

03

具体技术方法

04

设备与工具要求

05

质量控制措施

06

安全与防护规范

01

标本接收与准备

标本接收标准

完整性检查

时效性管控

标本类型分类

接收标本时需核对容器密封性、标签信息与申请单一致性，确保无渗漏、破损或标识模糊现象，避免交叉污染或信息混淆。

根据组织来源（如活检、手术切除、穿刺等）和临床需求（常规病理、冰冻切片、分子检测）进行分级登记，明确后续处理流程优先级。

需记录接收时间并评估标本保存状态，对特殊标本（如易自溶的胰腺、胃肠道组织）需优先处理，防止组织降解影响诊断准确性。

固定处理规范

固定液选择与配比

常规使用10%中性缓冲福尔马林，确保固定液体积为标本体积的5-10倍，对特殊组织（如脂肪、骨）需调整固定时间或添加辅助试剂。

固定时间控制

依据组织类型和厚度设定固定时长（通常为6-48小时），避免固定不足导致细胞形态失真或过度固定引起组织硬化。

大标本预处理

对体积超过3cm的标本需进行剖开或薄片化处理，确保固定液充分渗透，同时保留关键病变区域的完整性以供后续取材。

标识与记录要求

双重标识系统

采用防水标签和电子条码双重标识，标注患者ID、标本部位及唯一病理编号，关键信息需手工核对与系统录入同步完成。

异常情况记录

对不符合接收标准的标本（如未固定、标识缺失）需单独登记并反馈临床科室，留存书面说明及整改措施备案。

电子化追踪流程

通过LIS系统记录标本接收、固定、交接环节的操作人员及时间节点，实现全流程可追溯，减少人为差错风险。

02

切割基本原则

组织学结构优先原则

切割方向需平行于组织纤维走向或病变区域最大剖面，确保切片能完整展示组织学特征与病变层次，避免因方向错误导致诊断信息丢失。

分层渐进式切割

对于复杂或体积较大的标本，应采用分层切割法，先浅层定位关键区域，再逐步加深至目标深度，避免一次性切割过深损伤重要病变结构。

深度校准与标记

使用刻度尺或数字测量工具精确设定切割深度，并在标本边缘做标记线，确保后续切片的一致性，减少人为误差。

切割方向与深度设定

切片厚度控制标准

厚度严格控制在3-5微米范围内，过厚易导致细胞重叠影响镜下观察，过薄则可能造成组织撕裂或染色不均。

常规石蜡切片标准

针对特殊染色（如弹力纤维染色）或免疫组化需求，可适当调整厚度至2-3微米，以增强染色效果和抗原暴露。

特殊染色与免疫组化调整

术中冰冻切片需在保证完整性的前提下将厚度控制在5-8微米，兼顾快速制片与诊断清晰度的双重需求。

冰冻切片快速响应

工具选择与使用准则

优先选用高碳钢或一次性刀片，确保刃口无卷曲、缺口，每切割50-100个标本后必须更换或重新磨刃，防止组织拖拽损伤。

刀具材质与锋利度管理

搭配冷冻台、标本夹持器等固定工具，避免切割过程中组织移位；使用防颤支架减少手工操作带来的振动误差。

辅助工具配套使用

每次切割后需用二甲苯或酒精彻底清洁刀架及工作台面，涉及感染性标本时需高压灭菌处理，防止交叉污染。

清洁与灭菌流程

03

具体技术方法

确保标本充分固定于中性缓冲福尔马林中，修整组织至适宜厚度（通常2-3mm），避免过度挤压或变形，以保证后续切片质量。

采用梯度乙醇脱水后，使用二甲苯透明化处理，确保组织完全浸透石蜡，避免切片时出现裂隙或碎裂现象。

将组织置于熔融石蜡中包埋，冷却后使用切片机以3-5μm厚度连续切片，保持刀片锋利和角度稳定，减少皱褶或划痕。

将切片漂浮于温水浴中展平，贴附于载玻片上，经烘箱干燥后备用，注意控制水浴温度（40-45℃）以防组织过度膨胀。

常规切片操作流程

标本固定与修整

脱水与透明化处理

包埋与切片

展片与烘片

调整冷冻切片机至5-7μm厚度，切片时使用防卷板或毛笔辅助展平，防止组织卷曲或粘连，提高切片完整性。

切片厚度与防卷曲

切片后立即用95%乙醇或丙酮固定，快速进行HE染色，全程控制在10分钟内完成，以保留组织抗原性和细胞结构。

即时固定与染色

01

02

03

04

使用OCT包埋剂将新鲜组织速冻于-20℃至-25℃冷冻台中，避免冰晶形成导致组织形态破坏，确保冷冻均匀性。

快速冷冻与温度控制

每批切片需设置对照样本，记录冷冻时间、切片厚度及染色效果，确保结果可追溯性和诊断准确性。

质量控制与记录

冰冻切片技术规范

特殊标本切割要点

对于钙化灶或骨组织，需先进行脱钙处理（如EDTA或甲酸溶液），软化后再按常规流程切片，避免刀片损伤或组织碎裂。

钙化或骨组织处理

脂肪组织需延长脱水时间并提高石蜡渗透温度（60-65℃），切片前短暂冷冻以增强硬度，减少切片黏连或分层现象。

脂肪丰富组织处理

微小标本（如穿刺活检）需用滤纸或海绵包裹后包埋，切割时采用低角度进刀和