草莓茎尖脱毒快繁体系技术规程.docxVIP

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ICS65.020.01

CCSA015

T/NAIA

团体标准

T/NAIA0426—2025

草莓茎尖脱毒快繁体系技术规程

Technicalprotocolforvirus-freerapidpropagationofstrawberryusingapicalmeristems

2025-10-22发布2025-10-31实施

宁夏化学分析测试协会发布

T/NAIA0426—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位:宁夏大学、银川市农业技术推广服务中心。

本文件主要起草人:张雪艳、李浩、王欣怡、曹行行、李邦耀、张晶晶、谢明学、杨玲。

T/NAIA0426—2025

1

草莓茎尖脱毒快繁体系技术规程

1范围

本文件规定了草莓茎尖脱毒快繁的关键技术内容,包括外植体材料选择与消毒处理、愈伤组织诱导、不定芽分化与继代增殖、生根诱导及炼苗驯化等操作流程,明确了各阶段培养基组分与激素配比,构建了草莓脱毒苗快速繁育的标准化技术体系。

本文件适用于宁夏地区设施条件下草莓品种的脱毒种苗生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

NY/T2118-2012

蔬菜育苗基质

NY/T2236-2012

植物组培苗工厂化生产技术规程

NY/T5010-2016

无公害农产品种植业产地环境条件

T/DGSS001-2016草莓脱毒种苗生产技术规程

T/LWCM2-2017无公害食品草莓育苗技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1茎尖脱毒

利用草莓茎尖生长点中病毒含量极低的特点,通过无菌条件下切取茎尖并进行组织培养,以去除病毒污染、获得健康无毒植株的技术手段。

3.2无菌快繁

在严格无菌环境下,通过对外植体进行消毒、愈伤组织诱导、不定芽增殖及生根培养等步骤,实现草莓种苗快速、高效繁育的一种组织培养方法。

4场地环境条件

组培快繁条件应符合NY/T2236-2012要求;炼苗移栽驯化环境应符合NY/T5010-2016要求。

5生产技术管理

5.1外植体选择

选择健康、无病虫害、生长旺盛的母株新发生的草莓匍匐茎。

5.2无菌系的建立

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5.2.1外植体消毒

选取生长健壮、无可见病虫害的匍匐茎,剪除末端保留顶端约2-5cm,将处理好的匍匐茎用洗洁精溶液浸泡并搅拌15分钟,然后用无菌水冲洗3-5次后移入超净工作台中。先用浓度为75%的乙醇溶液浸泡处理30-60s,无菌水冲洗3-4次,然后分别使用0.1%升汞处理4-7分钟或10%过氧化氢处理10-15分钟或10%次氯酸钠处理8-12分钟。再用无菌水冲洗4-5次,然后用无菌吸水纸吸干匍匐茎表面水分,用解剖刀切取茎尖生长点0.2-0.5mm,将生长点接种至组培瓶内,数量由组培瓶容量决定,茎尖间距1cm以上。

5..2.2愈伤组织诱导

将茎尖剥离出的生长点接种在MS培养基+6-BA(1.0-1.5mg/L)+NAA(0.10-0.2mg/L)中进行愈伤诱导,数量由组培瓶容量决定,茎尖间距1cm以上。置于温度18-25℃、湿度60-70%、光照强度2000-3000lux、每日光照12-16小时的条件下。

5.2.3丛芽诱导诱导

将诱导出的愈伤组织接种在MS培养基+6-BA(1.5-2mg/L)+NAA(0.15-0.2mg/L)进行丛芽诱导,数量由组培瓶容量决定,愈伤组织间距2cm以上。置于温度18-25℃、湿度60-70%、光照强度2000-3000lux、每日光照12-16小时的条件下。

5.2.4增殖继代诱导

将诱导出的、带有多丛生芽的黄绿色愈伤组织,小心分割成约0.5-1.0cm3的小块(确保每块至少带有1个健壮芽点,避免损伤芽体)。种在MS培养基+6-BA(0.75-1mg/L)+NAA(0.1-0.15mg/L)进行增殖培养,数量由组培瓶容量决定,间距2c

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