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- 2025-10-23 发布于河南
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以铜为镜,可以正衣冠;以古为镜,可以知兴替;以人为镜,可以明得失。——《旧唐书·魏征列传》
临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验-免疫细胞功能检测技术
复习资料汇编
免疫细胞是指参与机体免疫应答的细胞,大致可分为两类,一类能识别特异
性抗原,一旦被激活则显示出特异性应答的功能,主要指淋巴细胞群,包括T细
胞、B细胞、NK细胞、K细胞等;另一类能捕获抗原,处理抗原,以一定方式提
呈给淋巴细胞或表现其他免疫功能,包括中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞等。
一、淋巴细胞的功能检测
(一)淋巴细胞功能测定可分为体内试验和体外试验。
(二)体内试验主要是进行迟发型超敏反应;
(三)体外试验主要包括淋巴细胞对抗原或有丝分裂原刺激后的增殖反应、
细胞毒性试验及淋巴细胞分泌产物的测定。
二、T细胞功能检测
(一)T细胞具有多种免疫生物学功能,如直接杀伤靶细胞、辅助或抑制B
细胞产生抗体,对特异性抗原或丝裂原刺激产生增殖反应及产生各种细胞因子。
(二)T细胞增殖试验
体外刺激T细胞增殖反应的刺激物包括植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)
和美洲商陆(PWM)、白喉类毒素、破伤风类毒素、纯化蛋白衍生物(PPD)和白
色念珠菌等。
(三)非特异性增殖
-丝裂原:PHA、ConA、PWM
-1-
饭疏食,饮水,曲肱而枕之,乐亦在其中矣。不义而富且贵,于我如浮云。——《论语》
(四)特异性增殖
-抗原:破伤风类毒素、PPD、白色念珠菌
(五)T细胞增殖试验
1.形态学检查法:形态学方法简便易行,普通光学显微镜便能观察结果,适
于基层实验室应用。缺点是依靠肉眼观察形态学变化,判断结果易受主观因素影
响,重复性和准确性较差。
2.3H-TdR掺入法(最标准):3H-TdR掺入法敏感性高,客观性强,重复性
好,但需一定设备条件,同时还存在放射性核素污染问题。
-2-
百川东到海,何时复西归?少壮不努力,老大徒伤悲。——汉乐府
3.MTT比色法(最常用):本方法的敏感性虽不及3H-TdR掺入法,但操作简
便,无放射性污染。
(六)T细胞分泌功能测定
体外培养的T细胞经各种丝裂原或抗原刺激后,分泌各种细胞因子,可借助
免疫学、细胞生物学及分子生物学技术分别检测细胞因子的含量、生物学活性和
基因表达水平,以反映T细胞功能。
1.T细胞介导的细胞毒试验
T细胞介导的细胞毒试验时细胞毒性T细胞(CTL)的特征,凡致敏T细胞再
次遇相应白细胞抗原,可表现出破坏和溶解包细胞,他使评价机体细胞免疫水平
的一种常用指标。该试验原则是选用适当的靶细胞(常用可传代的已建株的人肿
瘤细胞如人肝癌、食管癌、胃癌等细胞株),经培养后制成一定浓度的细胞悬液,
按一定比例与待检的淋巴细胞混合,共温育一定时间,观察肿瘤细胞杀伤的情况。
该试验是评价机体细胞免疫水平的一种常用指标,特别是测定肿瘤患者CTL
杀伤肿瘤细胞的能力,常作为判断预后和观察疗效的指标之一。
2.形态学方法
3.51Cr释放法
4.细胞增殖评价法(MTT法、3H-TdR掺入法等)
5.体内试验
(1)特异性抗原皮肤试验常用的特异性抗原皮肤试验为结核菌素皮肤试
-3-
天行健,君子以自强不息。地势坤,君子以厚德载物。——《周易》
验。
(2)PHA皮肤试验。
三、B细胞功能检测
(一)B细胞增殖试验
原理与T细胞增殖试验相同,但刺激物不同,小鼠B细胞可用细菌脂多糖
(LPS)作为刺激物,人则用含SPA
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