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Triciribine对dHL-60细胞极性化的调控机制及影响研究

一、引言

1.1研究背景与意义

细胞极性是多种不同类型细胞的共同特征，对多数细胞的分化和功能是必需的。细胞极性是指细胞中，某些胞质成分按一定空间顺序不均等分布，从而形成各种细胞内容物的浓度梯度，正是由于细胞极性的存在导致了细胞的不对称分裂。细胞极性对正常的细胞功能非常重要，在细胞分化、细胞迁移、细胞质分裂、以及组织器官的形成等众多生物学过程起着关键性的作用，而且极性的丢失与癌症等疾病状态有关。例如在神经细胞中，极性体现为树突专门接收信号，轴突专门发送信号。在癌症研究领域，冷泉港实验室等机构的科学家以果蝇为模型研究发现，一旦细胞丢失细胞极性蛋白如Scribble，将导致恶性结果发生，促进癌症发生，使细胞变成不受控制疯狂增殖的类型。在哺乳动物中，将乳房上皮细胞中的Scribble蛋白剔除，破坏细胞的极性，会导致细胞的三维结构发育不良，抑制细胞凋亡，细胞发育不正常，经过一段时间后（潜伏期），癌变发生。

dHL-60细胞作为一种常用的细胞模型，其极性化过程在生理和病理过程中扮演着重要角色。在生理状态下，dHL-60细胞的极性化参与了正常的免疫防御过程，比如在炎症反应中，dHL-60细胞能够通过极性化，快速准确地迁移到炎症部位，发挥免疫功能。在病理状态下，dHL-60细胞极性化的异常与多种疾病的发生发展相关，如白血病等血液系统疾病。研究表明，白血病细胞中dHL-60细胞极性化相关信号通路的异常激活或抑制，可能导致细胞的异常增殖和分化受阻。

Triciribine是一种具有多种生物学活性的化合物。它最初被发现是一种DNA合成抑制剂，后来研究发现其还能够抑制Akt，Akt是细胞内重要的信号转导分子，参与细胞增殖、存活、代谢等多种生物学过程。在肿瘤研究中，Akt的异常激活与肿瘤的发生、发展、转移和耐药密切相关。Triciribine通过抑制Akt，能够阻断相关信号通路，从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖，诱导肿瘤细胞凋亡。此外，Triciribine在一些疾病模型中展现出潜在的治疗效果，如在肺纤维化和肺动脉高压的小鼠模型中，Triciribine能够延缓或逆转病情进展。这是因为Akt1对于肌成纤维细胞的发育具有部分作用，而Triciribine抑制Akt1后，能够缓解肺部瘢痕化特征和肺部脉管系统的损失。基于Triciribine对Akt的抑制作用以及细胞极性化与Akt信号通路可能存在的关联，研究Triciribine在dHL-60细胞极性化中的作用具有重要意义。一方面，有助于深入揭示细胞极性化的分子机制，进一步完善细胞生物学理论体系；另一方面，为相关疾病（如白血病等）的治疗提供新的靶点和理论依据，具有潜在的临床应用价值，可能为开发新型治疗药物和治疗策略奠定基础。

1.2研究目的

本研究旨在深入探究Triciribine在dHL-60细胞极性化过程中的具体作用。具体而言，首先明确Triciribine对dHL-60细胞极性化是起促进作用还是抑制作用，通过观察细胞形态、细胞骨架重排等指标来直观判断细胞极性化状态的改变。其次，确定Triciribine影响dHL-60细胞极性化的作用浓度与时间关系。设置不同浓度梯度的Triciribine处理dHL-60细胞，在不同时间点进行检测，绘制浓度-效应曲线和时间-效应曲线，明确Triciribine发挥最佳作用的浓度和时间。最后，深入剖析Triciribine影响dHL-60细胞极性化的作用机制。从信号通路角度出发，研究Triciribine是否通过调控Akt信号通路以及其他相关信号通路（如Rho小G蛋白家族相关信号通路，Rho小G蛋白家族尤其是Rac1、Rac2和Cdc42通过调节细胞骨架聚集而参与细胞极性化和趋化的调节）来影响细胞极性化；从基因表达层面，利用基因芯片技术或实时定量PCR等方法，检测极性化相关基因在Triciribine处理前后的表达变化，全面揭示Triciribine在dHL-60细胞极性化中的作用机制，为后续相关研究和应用提供坚实的理论基础。

1.3国内外研究现状

目前，关于dHL-60细胞极性化的研究已取得一定进展。在dHL-60细胞极性化的调控机制方面，研究发现其受多种信号通路的共同调控，包括P13K依赖性信号通路和P13K非依赖性信号通路（如酪氨酸激酶类依赖性信号通路，像Src依赖性信号通路）。当趋化因子不同时，伪足伸展的调控机制中P13K依赖性信号通路和P13K非依赖性信号通路所占比例各不相同。例如