第五章 培养基灭菌.pptVIP

Diagram（二）喷射加热器物料从中间管进入，蒸汽从进料管周围的环隙进入，在喷嘴出口处快速、均匀地混合。具有加热速度快、震动小、噪声低等特点。第29页，共41页，星期日，2025年，2月5日LOGO第1页，共41页，星期日，2025年，2月5日Contents灭菌的目的、要求和方法1培养基的湿热灭菌2空气的除菌3无菌检测及发酵废气废物的安全处理4第2页，共41页，星期日，2025年，2月5日HotTip第一节培养基灭菌的目的、要求和方法一、定义1、培养基灭菌的定义是指从培养基中杀灭有生活能力的所有微生物，或从中将其除去。工业规模的液体培养基灭菌，杀灭杂菌比除去杂菌更为常用。第3页，共41页，星期日，2025年，2月5日HotTip2、灭菌（Sterilization）与消毒（Disinfection）的区别灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。第4页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram二、培养基灭菌的目的1、在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力；杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快，结果使发酵罐中以杂菌为主；杂菌及其产生的物质，使提取精制发生困难；杂菌会降解目的产物；杂菌会污染最终产品，杂菌会污染最终产品；发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象。第5页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram2、工业上具体措施包括（1）使用的培养基和设备须经灭菌；（2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理；（3）设备应严密，发酵罐维持正压环境；（4）培养过程中加入的物料应经过灭菌；（5）使用无污染的纯粹种子。第6页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram3、培养基灭菌的目的杀灭培养基中的微生物，为后续发酵过程创造无菌的条件。4、培养基灭菌的要求（1）达到要求的无菌程度（10-3）（2）尽量减少营养成分的破坏。第7页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram5、灭菌的应用范围（1）培养基灭菌（2）气体除菌（3）设备及管道的灭菌第8页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram６、灭菌的方法（1）化学灭菌原理：药物与微生物细胞中的成分反应，使蛋白质变性酶失活。常用的灭菌剂:甲醛、氯、高锰酸钾、臭氧等。使用范围：器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌，不能用于培养基灭菌。第9页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram（２）射线灭菌原理：利用高能量的电磁辐射与菌体核酸的光化学反应造成菌体死亡。常用：紫外线、X射线和γ射线。使用范围：用于室内空气及器皿表面灭菌。第10页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram（３）干热灭菌原理：利用高温对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩作用而杀灭微生物。常用方法：灼烧和电热箱加热，140-180℃1-2小时。使用范围：玻璃及金属用具及沙土管灭菌。第11页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram（４）湿热灭菌原理：蒸汽冷凝放出大量潜热，具有穿透力，且在高温有水分条件下，蛋白质易变性。常用方法：水煮常压灭菌：100℃饱和蒸汽灭菌：一般121℃，30分钟使用范围：培养基和发酵设备灭菌。第12页，共41页，星期日，2025年，2月5日Diagram（５）过滤除菌原理：利用微生物不能透过滤膜达到除菌的目的。方法:使用0.01～0.45μm孔径的滤膜。使用范围：用于压缩空气、酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌。第13页，共41页，星期日，2025年，2月5日第二节培养基的湿热灭菌一、湿热灭菌１、湿热灭菌的原理每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。当微生物处于最低温度以下时，代谢作用几乎停止而处于休眠状态。当温度超过最高限度时，微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性，使微生物在很短时间内死亡，加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。第14页，共41页，星期日，2025年，2月5日２、湿热灭菌中的相关定义杀死微生物的极限温度称为致死温度。在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。微生物的热阻（对热抵抗力）：是指微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间。相对热阻是指某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同