荧光光谱分析仪.pptVIP

原子发射光谱仪：利用试样中原子或离子所发射的特征谱线的波长或强度来检测元素的存在和含量的仪器。常用类型：1.火焰光度计和火焰分光光度计2.摄谱仪和光电直读光谱仪3.激光显微发射光谱仪三、原子发射光谱仪第60页，共85页。三、原子发射光谱仪6400A火焰光度计第61页，共85页。摄谱仪：是用光栅或棱镜做色散元件，采用照相方式用感光板记录试样光谱的原子发射光谱仪器。可以把试样的谱线拍摄长期保存备查。摄谱仪聚光性强，有利于提高灵敏度。类型：棱镜摄谱仪、光栅摄谱仪构成：光源、分光系统、检测系统三、原子发射光谱仪第62页，共85页。三、原子发射光谱仪棱镜摄谱仪光栅摄谱仪第63页，共85页。摄谱仪的激发光源基本功能：提供使试样中被测元素原子化和原子激发发光所需要的能量。要求：灵敏度高，稳定性好，光谱背景小，结构简单，操作安全。常用激发光源：电弧光源、电火花光源、电感耦合高频等离子体光源（ICP光源）等。三、原子发射光谱仪第64页，共85页。光谱带通指仪器主机狭缝宽窄程度的指数。以一定狭缝几何密度对应的光谱半宽度来直接表示光谱纯度。光谱纯度直接影响仪器的分辨率、灵敏度以及背景干扰。目前的荧光分光光度计的光谱带通在0.15nm～20nm之间，一般都采用连续可调方式。五、荧光光谱仪的性能指标第28页，共85页。信噪比与响应速度用空白样品测得的峰值叫做噪声峰值，待测样品测得的峰值和噪声峰值之比就叫做信噪比。信噪比越高，检测结果的准确性也越高。仪器的响应速度是指电路样品通道对光电信号反映的快慢。响应速度关系到波长扫描速度的选择、光谱峰的尖锐程度以及随机噪声的大小。五、荧光光谱仪的性能指标第29页，共85页。荧光光谱仪的使用与维护严格按照仪器规定的操作步骤进行操作。电源：电压、电流、电源的稳定须符合仪器规定。光源：需预热20min，灯及其窗口要保持清洁。单色器：应注意防潮、防尘、防污和防机械损伤。光电倍增管：加高压时切不可受外来光线直接照射。样品池：使用时应同一个方向插放，不能经常磨擦。六、荧光光谱仪的使用与维护第30页，共85页。仪器出现故障，必须请专门人员进行检修。安全防护：操作者不能直视光源，以免紫外线损伤眼睛。六、荧光光谱仪的使用与维护荧光光谱仪的故障排除第31页，共85页。七、荧光光谱仪的临床应用荧光光谱仪主要应用于以下方面：常规分析：用于荧光物质的定性和定量分析、化学表征、色谱流出物的检测等；获得分子信息：如测量分子内间距、决定键合平衡、研究结构变化等；第32页，共85页。医药研究：研究膜结构和功能、确定抗体的形态、研究生物分子的异质性、评价药物的相互作用、确定酶的活性和反应、荧光免疫分析、监测体内化学过程等；环境监测：水和空气中污染物的鉴别和计量等。七、荧光光谱仪的临床应用第33页，共85页。第二节原子光谱分析仪第34页，共85页。一、概述原子光谱分析仪的特点优点：分析速度快、操作简便、选择性好、灵敏度高、测定范围广、试剂用量少等，可同时测定多种元素，不必进行复杂的分离处理。缺点：对温度、pH值等因素变化比较敏感；应用范围较窄，只能用来测量发荧光的物质，或与某些试剂作用后发荧光的物质。第35页，共85页。一、概述原子光谱分析仪器原子吸收光谱仪原子发射光谱仪原子荧光光谱仪原子光谱分析仪的分类第36页，共85页。二、原子吸收光谱仪原子吸收光谱法(AtomicAbsorptionSpectroscopy，AAS)基本原理：从空心阴极灯或光源中发射出一束特定波长的入射光，在原子化器中待测元素的基态原子蒸汽对其产生吸收，通过测定吸收特定波长的光量大小，可求出待测元素的含量。第37页，共85页。原子吸收光谱法优点：灵敏度高、精确高；选择性好、干扰少速度快，易于实现自动化可测元素多、范围广结构简单、成本低二、原子吸收光谱仪第38页，共85页。原子吸收光谱仪（atomicabsorptionspectrometer）：采用原子吸收光谱法进行测量的仪器，又称原子吸收分光光度仪，是20世纪50年代中期出现并逐渐发展起来的一种新型仪器。结构原理与普通分光光度计相似，只是用锐线光源代替了连续光源，用原子化器代替通常的吸收池。二、原子吸收光谱仪第39页，共85页。原子吸收光谱仪工作原理光源发出与待测元素特征波长相应的射线，把试样的溶液以细粒子流的形式喷射到火焰上，部分射线被吸收。吸收的强度与试样的浓度成正比，通过测量吸收量，即可确定待测物质浓度。不同元素外层电子结构不同，其原子的吸收光谱也不同，