7500荧光定量PCR仪课件.pptxVIP

7500荧光定量PCR仪课件

单击此处添加副标题

汇报人：XX

目录

壹

PCR技术概述

贰

7500荧光定量PCR仪介绍

叁

荧光定量PCR原理

肆

实验操作流程

伍

实验结果验证

陆

安全与维护

PCR技术概述

第一章

PCR技术原理

基本反应步骤

变性、退火、延伸循环，指数级扩增DNA。

体外扩增DNA

模拟天然复制，体外酶促扩增特定DNA片段。

01

02

PCR技术发展史

起源于核酸研究，1971年提出体外扩增设想

起源与设想

1985年Mullis阐述PCR技术，1988年发现耐高温Taq酶

PCR技术诞生

1992年实时荧光定量PCR诞生，后续发展数字PCR技术

技术革新

PCR技术应用领域

疾病诊断

精准检测病原体，助力遗传病与肿瘤诊疗。

生命科学

推动基因组研究，解析物种进化与亲缘关系。

7500荧光定量PCR仪介绍

第二章

设备功能特点

适用于基因表达、病原体检测及SNP分析等。

广泛应用领域

半导体控温，快速模式40分钟内完成96样检测。

高效热循环

支持五色荧光，提高实验效率与准确性。

多色荧光检测

设备操作界面

直观展示操作区域，功能按钮清晰分布。

界面布局

支持触控操作，简化实验流程，提升操作便捷性。

触控操作

设备性能参数

能检测到≤10个拷贝数的模板，置信度99.7%。

高灵敏度检测

快速模式下96个样品检测时间40分钟，日通量可达5000样。

快速高效运行

支持5种荧光染料同步检测，波长范围500-650nm。

五色荧光检测

荧光定量PCR原理

第三章

荧光定量PCR原理

在PCR体系加荧光基团，实时监测扩增。

加入荧光基团

荧光信号与PCR产物同步累积，实现定量。

荧光信号累积

荧光标记技术

实时监测荧光强度变化

荧光信号监测

利用荧光物质标记目标分子

荧光标记原理

定量分析方法

通过比较样本间荧光信号差异分析。

相对定量法

01

利用标准曲线计算目标基因拷贝数。

绝对定量法

02

实验操作流程

第四章

样本准备步骤

根据实验需求收集并处理RNA或DNA样本，进行提取和纯化。

收集处理样本

将处理好的样本稀释至适当浓度，配制PCR反应体系。

样本稀释配制

PCR反应设置

准备DNA模板及引物等反应物。

精确配置PCR反应体系，包括酶、缓冲液、dNTP等。

样本准备

反应体系配置

数据分析与解读

将PCR数据转化为图表，直观展示扩增曲线和熔解峰。

结果可视化

结合Ct值与标准曲线，解读目标DNA的初始浓度，分析实验数据意义。

结果解读

根据扩增曲线，合理设定阈值，计算Ct值，评估目标DNA含量。

阈值设定

实验结果验证

第五章

结果准确性验证

01

重复实验验证

通过多次重复实验，对比结果一致性，确保数据可靠性。

02

阳性对照验证

设置阳性对照样本，验证实验体系的有效性及结果的准确性。

实验重复性检验

01

样本一致性

通过多次实验，验证不同批次样本结果的一致性。

02

数据稳定性

检验实验数据在不同时间点上的稳定性，确保结果可靠。

常见问题及解决

检查试剂质量，校准仪器，确保操作规范。

结果不准确

分析实验步骤，复查样本处理，重新进行实验验证。

数据异常

加强实验室清洁，使用无菌技术，避免交叉污染。

污染问题

01

02

03

安全与维护

第六章

实验室安全规范

严格遵循样本处理流程，避免交叉污染。

样本处理规范

使用手套、口罩等，防止样本污染和感染。

个人防护装备

设备日常维护

定期清洁PCR仪，保持仪器内外干净，确保实验准确性。

日常清洁保养

定期检查并更换易损部件，如光源、滤光片等，保障仪器正常运行。

部件检查更换

故障排除指南

02

01

检查USB线、灯泡及软件重装

软件连接故障

校正信息过期

根据报错代码，检查耗材或联系工程师

报错代码处理

尽快校正或联系工程师购买服务

03

谢谢

单击此处添加文档副标题内容

汇报人：XX