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第3章
基因突变与损伤DNA的修复;基因突变的类型和符号
常用的几个突变株
突变发生的机理(自发突变,诱发突变)
保证遗传稳定的机制(损伤DNA的修复);第一节基因突变的类型和符号;leu-,strr;(营养缺陷,抗性)
lacZ-;(表型符号为正体LacZ);
Δ(lac,pro);(缺失)
trpA::Tn5;(插入)
E.coliJM109;E.coliDH5α;
(菌株)
E.coliJM109Δ(lac,proAB)trpA::Tn5;二、基因突变的类型;2、营养缺陷型Ade-
3、抗性突变型Strr
4、致死突变型
5、条件致死突变型
6、产量突变型
;按照突变所引起的遗传信息的改变分类:
1、错义突变同一位置上的氨基酸改变
GAA(E)→AAA(K)
2、同义突变同一位置上的氨基酸不变
GAA(E)→GAG(E)
3、无义突变碱基突变后形成终止密码子
GAA(E)→UAA(stop);;1、碱基置换
转换PyPyPuPu
颠换PyPu
转换比颠换更常见
;2、移码突变(编码区);3、DNA片段插入和缺失
DNA大片段的缺失或重复,在放线菌中缺失范围从几个基因到几十个基因。;第二节常用的几个突变株;例:
供体E.coli(HfrStrs)
受体E.coli(F-Thr-Leu-Thi-Strr)
在含有链霉素和硫胺素的基本培养基只能分离到苏氨酸和亮氨酸的重组子
;第三节突变发生的机理
(自发突变,诱发突变);1、自发突变;;;;b)碱基异构式引起DNA复制的错配;A(a)T(k);A(a);环出效应;2、诱发突变;电离辐射引起DNA损伤的机理;b)非电离辐射—UltraVioletlight(U.V);2-2生物技术定点诱变;PCR原理;基因的定点诱变;突变oligo-dNt引物介导的PCR诱变;PfuDNApolymerase
fromPyrococusfuriosus(火球菌属);引物2合成的新生链不会使引物1靶序列发生替代;两通用引物(commonP1commonP2);基于PCR的随机诱变;;2-3化学诱变;b)碱基类似物导致的碱基错配;;A(a);;HNO2(NitrousacidNA);羟胺的致突变作用;d)烷化剂;甲基化;诱变效应;;Apurination(de-pu)脱嘌呤作用;e)嵌合剂和移码突变;第四节保证遗传稳定的机制
(损伤DNA的修复);复制过程中的错配修复;1、DNA的复制修复
1-1Mismatchrepairsystem;;MCEscanning;1-2(尿嘧啶-)N-糖苷酶系统;;;2-2切除修复;;;;;重组修复
(strandtransferrepair);2-4SOS修复;;第六十三页,共七十页。;RecA-P;三种功能;当DNA复制受阻/DNAdamaged;当DNA复制度过难关后;3、突变的形成;基因的回复突变(backmutation/reversemutation);第3章复习思考题
1.什么是突变?有哪些类型?
2.突变型lacZ-1是用AO处理E.coli诱导产生的,而lacZ-2是用5-BU诱导产生的,它们分别属于何种突变?为什么?通过对这些细胞中的半乳糖结构的研究能证实你的推断吗?(lacZ基因是编码半乳糖的结构基因)
3.自发突变由哪些因素引起?
4.放射线诱发突变的机理是什么?
5.化学诱变分为哪几类?它们是如何引起突变的?;谢谢大家!
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